分子诊断在任何诊断实验室中都是必不可少的。与此同时，快速检测产品已经成为公众关注的焦点。Milenia HybriDetect是一个通用平台，可用于基于侧流免疫层析的快速诊断方法开发。

什么是Milenia HybriDetect?

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Milenia HybriDetect是一种通用的侧向流动开发平台，供各研究人员开发独特的快速检测方法。它是一个多功能的工具，可以检测DNA, RNA，蛋白质，多肽，抗体，代谢物，细胞等…

在过去的几年里，核酸扩增和侧流层析的结合已经发展成为一个重要的诊断方法。通用型侧向流动装置是快速诊断方法的必要组成。因此，Milenia HybriDetect非常适合在各种环境下进行高敏感和高特异的核酸检测。

目前，Milenia HybriDetect“家族”包含两种试纸条，都包含一条质控线，以确认分析的准确性。Milenia HybriDetect 包含一条测试线，而Milenia HybriDetect 2T包含两条测试线。两种试纸条基本上都是“裸露”的条带，没有包含在塑料外壳中，方便各种应用，例如将试纸条直接放在小型反应管，如96孔板或PCR管。

如何进行侧流免疫层析

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操作简单是侧流层析方法除了稳定和省时之外最重要的优点。将样品直接应用于上样区后，将HybriDetect放置在足够体积的缓冲液中，几秒钟后，就可以看到金颗粒在整个分析膜上迁移。通常需要2到5分钟，即可出现清晰的信号。Milenia HybriDetect试纸条也可直接放入样品或含有样品的缓冲液中。最终通过检测线来判断样品的阳性或阴性信息。

Milenia HybriDetect是如何工作的？

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Milenia HybriDetect可用于检测多种带有特定标记的靶分子。不论是核酸扩增产物还是蛋白、抗体，只要带有标记就可以使用HybriDetect试纸条来检测，因此该试纸条的应用场景是非常广泛的。

图1. Milenia HybriDetect的检测原理

场景一：检测扩增产物

HybriDetect通常用于DNA扩增产物的快速检测。许多客户会使用带有Biotin、FITC/FAM修饰的引物，反应产物包含这些标签，从而可以在HybriDetect试纸条上被检测到。如PCR和多种等温扩增技术(如LAMP-LFA)均可以和HybriDetect一起应用。此外，由于标记探针的特异性杂交，这种方法允许大量核酸(如核糖体RNA)的直接检测（无需扩增）。

                                 图2. 标记引物合并到扩增产物中，该产物可在Milenia HybriDetect的测试线(T)上检测到

场景二：检测报告基因

报告基因需要包含相关标签(Biotin、FITC/FAM)。在检测过程中，该报告基因以某种方式降解。报告基因的状态可以利用Milenia HybriDetect进行检测。

                  图3. 报告基因的检测原理。双标记报告基因在检测反应中被降解。降解程度的增加与c线强度的增加相关。

基于报告基因的检测方法在分子生物学应用中发挥着越来越大的作用。基于CRISPR/ CAS的分析(例如SHERLOCK或DETECTR)，利用HybriDetect，可以用于新型检测方法的开发。

场景三. 非竞争性(免疫)分析

在下面的例子中，使用了一种具有完全不同生物成分的分析策略。Milenia HybriDetect适合作为发展个体抗体为基础的快速检测的通用平台。针对不同表位的特异性抗体必须用生物素和FITC/FAM进行标记。这些一抗能够结合靶标分子。

         图4. 非竞争性(免疫)分析，标记抗体能够特异性结合靶标分子，这种“三明治”结构可以HybriDetect试纸条上检测到。

通过使用这种标记和检测策略，已经建立的免疫分析(如ELISA)可以很容易地转化为侧流层析检测形式。

场景四. 竞争性（免疫）分析

在竞争性的LFAs中，信号的减弱或缺失与靶标分子的存在有关。检测线强度的减弱表明阳性结果。测试强度不变代表阴性测试结果。下图说明了使用Milenia HybriDetect进行竞争性检测的原理。

       图5.竞争(免疫)分析法的原理。标记的靶标与未标记的靶标(在样品中)竞争结合标记抗体。T线强度的降低与靶标分子的增加相关。

当然，HybriDetect试纸条作为一种通用型侧流分析平台，还有非常广泛的应用场景。目前已发表的超过250篇引用文献，涉及药物开发、兽医、食品安全、农业研究、分子诊断试剂盒等等多个领域。