2 × Tolo Fluorescent LAMP Premix
货号 | 25102 | 售价(元) | 1680 |
规格 | 100 rxn | CAS号 |
- 产品简介
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产品简介
2 × Tolo Fluorescent LAMP Premix 适用于以 DNA 模板的 LAMP (环介导等温扩增) 反应。LAMP 是常见的等温扩增技术,使用 LAMP 特异性引物和链置换聚合酶 Bst.快速扩增靶标核酸。该试剂盒是 2×预混液,包含 Bst.链置换聚合酶和优化的 LAMP 缓冲液。本产品中采用基因工程改造的 Tolo Bst. DNA polymerase,具有良好的耐热性能,非常适宜 LAMP 扩增。本产品同时提供荧光染料,便于在靶标核酸扩增过程中进行实时荧光监测。
产品组分
组分 |
25102 (100 rxns) |
2 × Tolo Super LAMP Premix |
1.25 mL |
50 × LAMP Floorescent Dye |
50 μL |
保存条件
≤ -20℃储存,≤ 0℃运输;
实验流程
1.制备10 × LAMP Primers Mix:
组分 |
体积 |
10 × 浓度(STOCK) |
1 × 浓度(STOCK) |
FIP Primers(100 μM) |
16 μL |
16 μM |
1.6 μM |
BIP Primers(100 μM) |
16 μL |
16 μM |
1.6 μM |
F3 Primers(100 μM) |
2 μL |
2 μM |
0.2 μM |
B3 Primers(100 μM) |
2 μL |
2 μM |
0.2 μM |
Loop F Primers(100 μM) |
4 μL |
4 μM |
0.4 μM |
Loop B Primers(100 μM) |
4 μL |
4 μM |
0.4 μM |
ddH2O |
Up to 100 μL |
|
|
◆ 在 nuclease-free water 中制备的 10 ×LAMP Primers Mix 可在–20°C 储存长达 2 年。
2.制备LAMP 反应体系:
组分 |
体积 |
2 × Tolo Super LAMP Premix |
12.5 μL |
10 × LAMP Primers(supplied by user) |
2.5 μL |
50 × LAMP Floorescent Dye |
0.5 μL |
Target DNA |
x μL(不超过反应总体积的 1/10) |
ddH2O |
Up to 25 μL |
◆ 室温解冻所有组分后置于冰上,短暂涡旋并瞬离后使用。
◆ 吸取反应预混液到所需的反应容器中并添加待测样品,短暂涡旋并瞬离后反应。
◆ 建议设置无模板的阴性对照反应体系,并用等体积的 nuclease-free water 补齐反应体系。
3.LAMP 反应程序
配制完成后,将上述反应体系置于 65℃孵育 30~60 min。对于拷贝数较低的待测靶标或复杂样品类型的反应,可根据需要适当延长扩增时间。85℃加热 5 min 便可灭活体系中的 Bst.酶。
注意事项
1. 可在冰上或室温条件下,将 2 × Tolo Super LAMP Premix 解冻,充分混匀后使用;不推荐对预混液进行加热溶解。
2. 建议反应完成后避免开盖。如需琼脂糖凝胶电泳或其他后续分析,应在分区空间或单独设备中进行开盖。
3. 本产品仅供科研使用。