产品信息

产品简介

       本公司开发的外泌体提取试剂盒能够从尿液、唾液等体液样本或细胞上清中提取完整的外泌体，无需超速离心，本试剂盒可同时操作多个样本，方便高效。

产品组成

       外泌体提取试剂盒 (EVtrap) 组份如下：

优势

       1.操作方便，无需超离，仅耗时2h;

       2.该试剂盒适合细胞上清，尿液，唾液和脑脊液等体液样本，具体使用比例见下表；

       3.客户已发表文献，性价比高，纯度上乘；

       4.满足多种应用需求：外泌体-细胞共培养实验、蛋白质组学研究； NGS高通量测序、 QPCR、WB、 ELISA等检测。

原理

       EVtrap中的功能化磁珠可以将EVs捕获到带有亲水性和亲脂性的修饰珠上，这些磁珠对脂质包裹的 EVs具有独特亲和性。

存储条件

       将EVtrap磁珠储存在4℃,孵育液洗涤液等储存在室温。

操作步骤

      尿液的制备

取晨尿(中段尿),2500g离心10min以去除细胞碎片，收集上清，重复1次，将处理好的尿液放置在-80℃储存备用。

      外泌体的分离纯化

1.向10mL的尿液中加入1mL Incubation Solution I上下混匀(若尿液储存在-80℃,可以在37℃的水 浴中解冻后使用);

2.加入200μL的EVtrap magnetic室温下孵育0.5-1h, 磁吸去上清；

3.加入10mL Incubation Solution Ⅱ 上下颠倒混匀20-30次，磁吸去上清；

4.加入5mL Washing Buffer上下颠倒混匀20-30次，磁吸去上清，洗1次；

5.加入1mL Washing Buffer上下颠倒混匀20-30次，转移至1.5mL离心管，磁吸去上清； 

6.加入200μL的Elution Buffer, 涡旋10min;

7.磁吸收集洗脱液，重复步骤6,将两次洗脱液共400μL合并到一个离心管中，涡旋混匀后再瞬离； 

8.冻干洗脱液，将冻干后样品置于-80℃长期保存，或用于下游检测实验。

注意事项和免责说明

       1.将 EVtrap magnetic储存在4°C, 孵育液和洗涤液等储存在室温；

       2.磁吸时请使用高磁磁力架，以保证磁珠的外泌体捕获效果；

       3.在任何洗涤步骤中不要剧烈涡旋。将样品上下颠倒20-30次使磁吸后的磁珠结团分散即可；

       4.孵育后的操作步骤中，在进行上下颠倒混匀时，动作要轻柔，以避免与EVtrap magnetic捕获的外泌 体脱落；

       5.本品仅限于专业人员的科学研究使用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。  

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