产品信息

产品简介

本试剂盒采用磁珠捕获法提取外泌体，将两亲性基团组合修饰在生物磁珠上，使得磁珠对脂质包被的外泌体（EVs）具有独特的亲和力，能从尿液、唾液等样本或细胞上清中提取外泌体，无需超速离心，可同时操作多个样本，方便高效，可兼容下游NTA、WB、电镜、蛋白组学检测等实验。

产品组成及储存条件

外泌体提取试剂盒 (EVtrap) 组份如下：

有 效 期 1 年。

操作流程;

注：该试剂盒适用于多种样本，如尿液、细胞上清、唾液及脑髓液等，100ul EVtrap magnetic beads对应的可提取的样本量见下表

样本预处理

1、细胞上清

1）收集细胞上清5-20ml(收集时细胞培养密度不低于1×106cfu/ml);

2）细胞上清离心（3000g、10 min），保留上清；

3）上清样本使用0.22um滤膜过滤，备用。

2、尿液

1）采集中段晨尿约5-20ml,离心（3000g、10 min），保留上清；

2）上清浓缩至5ml(建议使用10K-100K的超滤管进行浓缩）；

3）样本浓缩后，使用0.22um滤膜过滤，备用。

3、唾液、脑脊液

1）收集唾液（脑脊液采用腰椎穿刺收集）1-3ml；

2）3000g、10 min离心，收集上清；

3）上清使用0.22um滤膜过滤，备用。

EV分离（以尿液样本为例，其余样本按对应使用比例进行分离）

1) 向10ml的尿液中加入1ml  Incubation  Buffer Ⅰ上下混匀（样本量：Incubation Buffer Ⅰ

=10:1 ）;

2) 加入200ul的EVtrap magnetic beads 室温下孵育0.5-1h，磁吸3 min 去上清；

3) 加入10ml Incubation Buffer II 上下颠倒混匀20-30次，磁吸3 min 去上清；

4) 加入5ml Washing Buffer 上下颠倒混匀20-30次，磁吸3 min 去上清，洗一次；

5) 加入1ml Washing Buffer 上下颠倒混匀20-30次，转移至1.5ml离心管，磁吸3 min 去上清；

6) 加入200ul的Elution Buffer ，剧烈涡旋10 min；

7) 磁吸3 min 收集洗脱液，重复步骤6，将两次洗脱液共400ul合并到一个离心管中，涡旋混匀后

再瞬离；

8) 冻干洗脱液，将冻干后样品置于-80℃长期保存，或用于下游检测实验。

注意事项和免责说明

1.将 EVtrap magnetic beads 储存在4°C, 孵育液和洗涤液等储存在室温；

2.磁吸时请使用高磁磁力架，以保证磁珠的外泌体捕获效果；

3.孵育后的操作步骤中，在进行上下颠倒混匀时，动作要轻柔，以避免与EVtrap magnetic beads捕获的外泌体脱落；

4.本品仅限于专业人员的科学研究使用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。  

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