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横向流动试纸条LFD试纸,为什么要做成Red-Blue双色

   刚接触Lateral flow产品的时候,要么是胶体金,要么是红乳胶。也没有想过还有更多变化。直到看到梅里埃之前的VIKIA系列的快诊产品,才意识到彩色乳胶,可红,可蓝,可黄,可绿,可彩虹。有些产品就采用了多色颗粒在一个产品上。接触过一个流感的产品,C线绿色,甲流蓝色,乙流红色。还有一种就是C线变色的设计,如BinaxNow的xinguan抗原试剂

 

   在使用之前,就有一条蓝色C线。在完成测试之后,C线从蓝色变成红色。
今天介绍一款核酸试纸,来自南京沃博生物的Red-Blue双色核酸试纸。它采用双色系统不仅仅是为了好看,还有一番别出心裁。
   沃博生物的核酸试纸的原理和其也是非常类似的,但是亲和素用来偶联了金颗粒,抗FITC抗体用来包被了T线。同时采用红色胶体金颗粒对应T线蓝色乳胶颗粒对应C线

 

 

试纸完成测试后,从左往右分别展示的是,阴性,阳性,无效,和假阳结果

 

 

当使用快速等温扩增核酸,特别是RPA系统时,很容易出现假阳性结果
通过使用Red-Blue双色系统,当出现假阳性结果时,就可以进行快速的假阳性分析。 

假阳1,如果T线红色比较强,可能核酸扩增出假阳 

假阳1,如果T线红色比较弱,可能引物形成二聚体

假阳2,如果T线蓝色假阳,修饰了FITC的这段引物具备了捕获Mouse IgG的特性,成了一个Aptamer

这样可以帮助科研人员快速的进行Trouble shooting, 也是多色系统一种创新的应用。

还把单T线升级到了双T线,实现双靶标双系统检测。

 

并且双系统T线采用独立的系统,相互不会干扰和竞争

T线,

biotin-DNA-FITC

T线,

biotin-DNA-FITC 

Digoxin-DNA-TAMRA 

除了上述的彩虹核酸试纸,也有用于CRISPR的Cas12/13专用检测试纸。并且好调试好了检测浓度。

 

 

检测探针质量

在阴性对照中,稀释探针的浓度至200 nM,进行切割反应。当试纸条结合垫端浸入Cas12/Cas13切割产物后的5~7 min内,试纸条T线显色,即说明探针含游离的Biotin或者游离的FITC,探针纯度不足导致假阳性结果。建议更换探针合成供应商,重新合成探针。

 

探针载量接受范围

探针使用浓度为20~50nM的情况下,试纸条结合垫端浸入Cas12/Cas13切割产物后的30 min内,T线均不会显色。

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