微管是由蛋白质组成的管状结构，是维持细胞形态的骨架。但是，微管蛋白不仅仅如此简单。如今对Tubulin蛋白以及微管的聚合与解聚的研究已经成为当今癌症研究领域的热点之一。
Cytoskeleton Inc.是第一家为科学界提供生物活性微管蛋白、试剂盒和试剂的公司。我们持续提供微管蛋白试剂盒，可以帮助科研工作者高效地研究微管蛋白动力学；从而提高科学生产力，同时节省研究人员宝贵的时间。
微管蛋白聚合检测试剂盒
两种常见的微管蛋白聚合检测试剂盒类型：
（1）基于荧光分析（DAPI荧光基团）的新型聚合分析方法（Fluorescence-based）
（2）基于吸光度（光散射）的经典型分析方法（OD-based）
在大多数情况下，建议使用基于荧光分析的新型聚合分析方法，因为该种检测方法具有高灵敏度、高效、高通量且性价比高等优点。该方法是基于光散射原理，激发光透过微管会发生散射，其散射程度与微管聚合物的浓度在一定范围内成正比。根据这一原理我们便能通过检测样品吸光度从而监测微管的聚合。
与微管蛋白相互作用的化合物或蛋白质通常会改变聚合的一个或多个特征阶段。如图1所示，在标准聚合反应中加入抗有丝分裂聚合增强剂紫杉醇（Paclitaxel）后，可以观察到浓度为3µM的紫杉醇可消除成核阶段，提高生长阶段的Vmax值。因此，该分析方法的一个应用是鉴定新型抗有丝分裂剂。图1还显示了添加微管稳定药物长春碱（Nocodazole）的效果。在3μM的最终浓度下，长春碱引起V-max的急剧下降和最终聚合物质量的降低。
图1. 使用基于荧光分析法的微管蛋白聚合检测试剂盒（BK011P）进行。Tubulin分别与Paclitaxel和Vinblastine反应，且设置另一个单独孵育Tubulin作为对照组。每个条件都进行了重复的测试。聚合反应在360 nm下激发，420 nm发射。实验结果表现为聚合曲线，该曲线将聚合过程分为3个阶段：成核期，生长期，和稳态期。
部分相关热门试剂盒：
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Tubulin生化试剂盒名称 |
货号 |
规格 |
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Tubulin Polymerization Assay Biochem Kit™>97% Pure Porcine Brain Tubulin, OD Based |
24-30 Assays |
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Tubulin Polymerization Assay Biochem Kit™>99% Pure Porcine Brain Tubulin, OD Based |
24-30 Assays |
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Tubulin Polymerization Assay Biochem Kit™>99% Pure Porcine Brain Tubulin, Fluorescence based |
96 Assays |
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Microtubule Binding Protein Spin-Down Assay Biochem Kit™ |
30-100 Assays |
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Microtubule / Tubulin In Vivo Assay Biochem Kit™Quantitates in vivo ratio of tubulin polymers & monomers |
30-100 Assays |
纯化的微管结合蛋白(MAPs)和马达蛋白（Motors）
微管结合蛋白 ( Microtubule Associated Proteins，MAP) 是与微管或微管蛋白可以相互作用的蛋白质。通过与微管的相互作用，MAP 蛋白执行一系列功能，包括微管的动态控制、沿微管运输、协助细胞运动和塑性，以及一系列其他的功能。
如常见的MAP1、MAP2和Tau蛋白在中枢神经系统组织中表达，且有助于稳定微管的结构。马达蛋白（Motor）也可以被分类为MAP蛋白，但通常被称为驱动蛋白（Kinesin）或动力蛋白（Dynein）。细胞骨架专家Cytoskeleton公司提供的MAP相关蛋白是从富含MAP的tubulin蛋白中分离出来的，这种tubulin蛋白主要含有MAP2，但也含有少量的MAP1、MAP4和Tau蛋白。Cyto还提供来自脑组织的Tau蛋白，Tau蛋白有四种常见的亚型。
部分相关热门MAPs蛋白及Motors蛋白：
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产品 |
来源 |
纯度 |
货号 |
规格 |
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Eg5 Homolog BimC Motor Domain Protein |
A. nidu- lans |
>85% |
2 x 25 µg |
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Chromokinesin Motor Domain Protein |
H. sapiens |
>85% |
2 x 25 µg |
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Eg5 Motor Domain Protein |
H. sapiens |
>85% |
2 x 25 µg |
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10 x 25 µg |
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1 x 1 mg |
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Eg5 Homolog BimC Motor Domain Protein |
A. fumiga- tus |
>85% |
2 x 15 µg |
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KIFC3 Motor Domain Protein |
H. sapiens |
>85% |
2 x 25 µg |
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KIF3C Motor Domain Protein |
H. sapiens |
>85% |
2 x 25 µg |
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Kinesin Heavy Chain Motor Do- main Protein |
H. sapiens |
>85% |
2 x 25 µg |
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1 x 1 mg |
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MCAK Motor Domain Protein |
H. sapiens |
>85% |
2 x 25 µg |
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MKLP1 Motor Domain Protein |
H. sapiens |
>85% |
2 x 25 µg |
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1 x 1 mg |
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Tau ProteinBovine brain |
Bovine Brain |
>90% |
1 x 50 µg |
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3 x 50 µg |
图2. Pre-Formed Microtubules (Cat.# MT002) 微管是马达驱动蛋白的底物，马达驱动蛋白在细胞内参与很多的驱动活动。马达驱动蛋白被证明可以承载着如染色体和囊泡的载体沿着微管轨道移动。下图所示的Pre-Formed Microtubules（Cat.#MT002）是马达驱动蛋白的底物之一，这个蛋白与Kinesin Enzyme Linked Inorganic Phosphate ATPase Kit (Cat. #BK060)同时使用，可以用于检测MAPs。
Tubulin免疫荧光（IF）呈象工具
Cytoskeleton公司提供亮度高且性质稳定的微管蛋白活细胞呈象工具，如荧光标记微管蛋白，SiR, SiR700和SPY™探针。
Cyto公司的荧光标记微管蛋白具有高纯度和高生物活性的特点，用荧光微管蛋白工具来进行微管动力学实验，使用
我们的荧光小管蛋白和Spirochome的SiR、SiR700和SPY™探针，提供了明亮和稳定的微管蛋白活细胞成像工具。细胞骨架的荧光管蛋白纯度高，高度公开，具有生物活性。利用荧光微管蛋白工具研究微管动力学，利用Spirochrome探针观察活细胞中的微管蛋白。
图3.
部分相关热门荧光标记Tubulin蛋白：
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产品 |
Ex / Em wavelength |
来源 |
纯度 |
货号 |
规格 |
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AMCA Labeled Tubulin |
350 +/-20 nm |
Porcine Brain |
>99% |
5 x 20 µg |
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440 +/-20 nm |
20 x 20 µg |
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HiLyte Fluor™ 488 Labeled Tubulin |
460 +/-20 nm |
Porcine Brain |
>99% |
5 x 20 µg |
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520 +/-20 nm |
20 x 20 µg |
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TRITC Rhodamine Labeled Tubulin |
535 +/-20 nm |
Porcine Brain |
>99% |
5 x 20 µg |
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590 +/-20 nm |
20 x 20 µg |
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X-Rhodamine Labeled Tubulin |
560 +/- 20 nm |
Bovine Brain |
>99% |
5 x 20 µg |
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620 +/- 20 nm |
20 x 20 µg |
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HiLyte Fluor™ 647 Labeled Tubulin |
620 +/-20 nm |
Porcine Brain |
>99% |
5 x 20 µg |
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670 +/-20 nm |
20 x 20 µg |
Spirochrome的活细胞染色探针可通过细胞膜的物质，并可以对微管蛋白进行染色。与SiR和SiR700染料相比，SPY™具有亮度更高、细胞毒性更低的特点，无需基因操作或过表达即可对微管进行染色
图4. 左图：在Matrigel基质胶中，用SIR-Tubulin（红色）对MCF10A细胞中表达的H2B-GFP基因(蓝色)进行染色；右图：用共聚焦显微镜与STED显微镜成像的SPY™染料标记的HeLa细胞相比较。
部分热门活细胞呈象工具：
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产品名 |
Ex/Em |
货号 |
规格 |
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SiR-Tubulin™ KitIncludes SiR-Tubulin, and Verapamil |
630 / 680 nm |
50 nmol |
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Cytoskeleton KitIncludes SiR-Actin, SiR-tubulin andVerapamil |
630 / 680 nm |
50 nmol each |
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SiR700-Tubulin KitIncludes SiR700-Tubulin and Verapamil |
690 / 720 nm |
35 nmol |
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SPY555-TubulinIncludes SPY555-Tubulin |
555 / 580 nm |
100 stains |
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SPY650-TubulinIncludes SPY650-Tubulin |
652 / 674 nm |
100 stains |
纯化的微管蛋白
对于一般的研究目的，推荐适用来自脑组织的微管蛋白（纯度大于99%）（# T240）。这是一种用于微管结合研究和微管聚合分析的高通量底物。其他更专门的微管蛋白包括来自癌症细胞的微管蛋白，适用于药物筛选，以及来自植物或真菌来源的微管蛋白，它们分别适用于不同领域。
部分热门纯化微管蛋白：
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产品名 |
来源 |
纯度 |
货号 |
规格 |
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Tubulin Protein Lyophilized (no glycerol) |
Porcine Brain |
>99% |
1 x 1 mg |
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5 x 1 mg |
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20 x 1 mg |
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1 x 10 mg |
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Tubulin Protein, MAP rich |
Porcine Brain |
70% tubulin 30% MAPs |
1 x 1 mg |
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5 x 1 mg |
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1 x 10 mg |
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Tubulin for HTS Applications |
Porcine Brain |
97% |
1 x 4 mg |
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1 x 40 mg |
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Tubulin Protein |
Porcine Brain |
>99% |
1 x 1 mg |
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|
5 x 1 mg |
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20 x 1 mg |
关于Cytoskeleton
Cytoskeleton作为专业的细胞骨架和小G蛋白相关产品的生物科技公司，可以提供专业且高度可靠的Pulldown和GLISA检测试剂盒，在过去的20年里，无数各个领域的研究人员已经利用Cytoskeleton的产品产出许多优秀的实验成果。