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糖原PAS染色液

货号 HC0882 售价(元) 477
规格 50ml×4 CAS号
  • 产品简介
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货号

名称

规格

HC0882

糖原PAS染色液

50ml×4

简介:

糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus 在 1946 年最先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色试剂盒不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的 1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛与 Schiff 试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化,这是很关键的步骤。

糖原PAS染色液专门用于培养细胞的染色,是采用特有配方技术,大大增强了染色效果;性能稳定,特异性强;操作简捷,仅需 1h。该试剂适用于科研领域,不适用于临床诊断。。

产品组成:

产品名称

HC0882

Storage

试剂(A):过碘酸溶液

50ml

4°C避光

试剂(B):Schiff Reagent

50ml

4°C避光

试剂(C):苏木素染色液

50ml

RT

试剂(D):酸性乙醇分化液

50ml

RT

说明书

一份

 

储存条件 一年有效。

自备材料 1、10%福尔马林固定液 2、蒸馏水 3、系列乙醇

操作步骤(仅供参考): 

1、常规固定,常采用 10%福尔马林固定液,常规脱水包埋。

2、石蜡切片二甲苯或脱蜡透明液脱蜡入蒸馏水﹔冰冻切片直接入蒸馏水。

3、自来水冲洗 2~3min,再用蒸馏水浸洗 2 次。入过碘酸溶液室温氧化。

4、入过碘酸溶液室温放置 5~8min,一般不宜超过 10min。

5、自来水冲洗 1 次,再用蒸馏水浸洗 2 次。

6、入 Schiff Reagent 置于室温阴暗处浸染 10~20min,自来水冲洗 10min。

7、入苏木素染色液,染细胞核 1~2min,酸性乙醇分化液分化 2~5s。

8、自来水冲洗 10~15min,更换蒸馏水清洗,使其返蓝。

9、逐级常规乙醇脱水,二甲苯或脱蜡透明液透明,中性树胶封固。

染色结果:

PAS 反应阳性物质(糖原或多糖)

红色或紫红色

细胞核

蓝色

细胞

深浅不一的红色

备注:样品在过碘酸溶液和 Schiff Reagent 中作用时间的长短很大程度上影响颜色的深浅。

阴性对照(可选):

1、取淀粉酶 1g 溶解于 PBS(pH5.3)100ml,处理 30~60min,与其他切片共同入过碘酸溶液。结果应为阴性。

2、(备选方案)取唾液片(过滤后用)处理 30~60min,与其他切片共同入过碘酸溶液。结果应为阴性。

3、(备选方案)如果对照片采用其自身样本,对照片不经过碘酸溶液这一步,直接入SchiffReagent,结果应为阴性。

注意事项: 

1、过碘酸不宜过久氧化,氧化时的温度最佳范围为 18~22℃。

2、过碘酸溶液、苏木素染色液、Schiff Reagent 应密闭保存于 4℃,使用时避免接触过多的阳光和空气,使用前需提前 30min 取出放至室温,并在避光暗处使用。

3、关于过碘酸和 Schiff 的作用时间非常重要,需要根据切片厚薄、细胞或组织的类别等实验具体情况决定。

4、切片脱蜡应尽量干净,否则影响染色效果。

5、酸性乙醇分化液应经常更换新液,其分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和分化液的新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够。

6、冷冻切片染色时间尽量要短。