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脱氧核糖核酸(DNA)检测试剂盒(二苯胺比色法)

货号 HC0796 售价(元) 293
规格 100T CAS号
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货号

名称

规格

SH0796

脱氧核糖核酸(DNA)检测试剂盒(二苯胺比色法)

100T

简介:

脱氧核糖核酸中的α—脱氧核糖在酸性环境中变成ω—羟基—γ酮基戊醛与二苯胺试剂一起加热产生蓝色化合物,在 595nm 处有最大的吸收,在每毫升含 DNA20~400 微克范围内,光密度与DNA的浓度成正比,在反应液中加入少量乙醛,可以提高反应的灵敏度。

试剂组成和配制:

产品名称

SH0796-100T

Storage

试剂(A):DNA 标准溶液(200μg/mL)

2×1ml

-20°C

试剂(B):二苯胺溶液

100mL

RT避光

试剂(C): 乙醛溶液

1mL

4℃

临用前试剂 B:试剂 C=100:1 比例混匀即为二苯胺试剂。

说明书

一份

操作步骤(仅供参考):

(一)DNA 标准曲线的制作

6 支试管,编号,按下表加入试剂

编号

0

1

2

3

4

5

DNA 标准溶液(μl)

0

100

200

300

400

500

蒸馏水(μl)

500

400

300

200

100

0

二苯胺试剂(μl)

1000

1000

1000

1000

1000

1000

加毕,摇匀,于60℃恒温水浴中保温1小时,(或于沸水中煮沸15分钟,冷却测0.D595nm值。)以吸光度为纵坐标,DNA 含量(ug/ml)为横坐标,绘制标准曲线。

(二)样品的测定

2 支试管,各加 0.2 毫升的待测液(内含 DNA 应在标准曲线可测范围之内)加蒸馏水稀释至0.5毫升,再加 1 毫升二苯胺试剂,摇匀,其操作步骤与标准曲线的制作相同。根据测得的吸光度值,从标准曲线上查出相当该吸光度 DNA 的含量,按下式计算出样品中 DNA 的百分含量。DNA 含量/毫升待测液=标准曲线查得值×稀释倍数

注意事项:

1. 二茉胺法测定 DNA 含量灵敏度不高,待测样品中 DNA 含量低于50mg/L 即难以测定。乙醛可增加二苯胺法测定 DNA 的发色量,又可减少脱氧木糖和阿拉伯糖的干扰,能显著提高测定的灵敏度。

2. 样品中含有少量 RNA 并不影响测定,但因蛋白质、多种糖类及其衍生物、芳香醛、羟基醛等能与二苯胺反应形成有色化合物,故能干扰 DNA 定理。

3、本产品仅供科研使用,严禁它用。