ChainFree® Anti-DYKDDDDK (Flag) Magnetic Beads
| 货号 | F1001 | 售价(元) | 1770/2970/11970 |
| 规格 | 0.5 mL/1mL/5mL | CAS号 |
- 产品简介
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货号 |
名称 |
规格 |
存储 |
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F1001-0.5mL |
ChainFree® Anti-DYKDDDDK (Flag) Magnetic Beads |
0.5mL |
4℃ |
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F1001-1mL |
ChainFree® Anti-DYKDDDDK (Flag) Magnetic Beads |
1mL |
4℃ |
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F1001-5mL |
ChainFree® Anti-DYKDDDDK (Flag) Magnetic Beads |
5mL |
4℃ |
产品简介
ChainFree® Anti-DYKDDDDK (Flag) Magnetic Beads(ChainFree® Anti-Flag 纳米抗体磁珠)偶联了经过严格筛选、优化并重组表达的 Flag 纳米抗体,可用于捕获哺乳动物、植物、细菌、酵母、昆虫等多种生物细胞、组织提取物中的 Flag 标签(DYKDDDDK)融合蛋白及其相互作用蛋白。
实验前先将 Flag 标签与目标蛋白在细胞或组织中融合表达;之后将 ChainFree® Anti-Flag 磁珠加入样本裂解 液中,Flag 纳米抗体与目标融合蛋白及其结合蛋白形成复合体;去除未结合的蛋白后,可以采用多种方法洗脱蛋白质,并且 IP 洗脱液中不会有抗体轻、重链污染。
产品属性
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磁珠直径 |
2 µm |
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蛋白结合量 |
≥1.5mg 蛋白/mL 磁珠 |
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反应性 |
可特异性结合 1×或 3×Flag 标签(DYKDDDDK),对融合蛋白 N 端、C 端或中间的 Flag 标签均可以识别 |
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应用 |
免疫沉淀(IP)、免疫共沉淀(CoIP)、染色质免疫沉淀(CHIP)、RNA 结合蛋白免疫沉淀(RIP) |
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储存缓冲液 |
20 mM PBS, 5% BSA |
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储存条件 |
4℃储存,避免冻存!有效期 1 年 |
使用说明
I 所需主要仪器
磁力架、混匀仪、低温离心机、超声破碎仪。
II 建议的缓冲液配方
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缓冲液 |
配方 |
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裂解缓冲液 |
10 mM Tris-HCl pH 7.5,150 mM NaCl, 0.5 mM EDTA,0.5 % NP-40(在 4℃下调整 PH) |
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漂洗缓冲液 |
10 mM Tris-HCl pH 7.5,150 mM NaCl,0.5 mM EDTA,0.05 % NP-40(在 4℃下调整 PH) |
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洗脱缓冲液 |
3×Flag 多肽用 PBS 溶解成 400 ng/µL |
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2×SDS-PAGE 上样缓冲液 |
125 mM Tris-HCl pH 6.8,4% SDS,20%甘油,0.004%溴酚蓝 |
III 注意事项
1.请勿干燥、冷冻或剧烈涡旋磁珠,禁止长时间置于磁场,可能会引起磁珠聚团,降低结合活性。
2.为保证磁珠均匀分布,请通过反复颠倒、轻微涡旋彻底混匀瓶中磁珠。
3.请勿使用 PBS 漂洗磁珠,否则会导致磁珠无法被磁力架吸附。
4.实验前应在裂解缓冲液和漂洗缓冲液中加入足量的蛋白酶抑制剂,RIP 实验还应添加足量的 RNase 抑制剂,混合均匀,冰上保存,现配现用。
5.IP 实验前,应先确认样本裂解液(input)中诱饵蛋白的表达水平。
6.IP 实验应设置阴性对照组,通常采用表达 Flag 标签空载体的样本作为对照。
7.如果使用建议的缓冲体系不能获得很好的实验结果,可自行筛选、配制缓冲液进行实验。
8.具体样品量和孵育时间依赖于每个特定体系,可能需要优化才能得到最大产量。
9.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
10.本产品仅限于科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗。
说明书:
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