产品简介

本试剂盒采用 ChainFree® Anti-Flag 磁珠来高效完成 Flag 标签（DYKDDDDK）融合蛋白的 RNA 免疫共沉淀 （RIP）实验。ChainFree® Anti-Flag 磁珠偶联的是经过严格筛选、优化并重组表达的无轻、重链的 Flag 抗体，所 以 IP 洗脱液中不会有抗体轻、重链污染。

实验前先将 Flag 标签与目标蛋白在植物样本中融合表达。裂解样本后，将 ChainFree® Anti-Flag 磁珠加入样 本中，磁珠上偶联的 Flag 抗体与 Flag 标签融合蛋白及其结合 RNA 形成复合体，去除未结合的物质后，洗脱并分 离蛋白与 RNA，再利用 qPCR 或高通量测序（Seq）方法来鉴定或筛选与目标蛋白结合的 RNA。

试剂盒成分

＊注意：该试剂盒包含足够完成12、24或40个反应的试剂，每个反应使用40μL磁珠。由于每次pull-down实验至少需要设置一个实验组和一个阴性对照组，因此一次实验至少需要使用2个反应的试剂量。

额外所需材料

1. 自备试剂：Flag抗体（用于Western-Blot检测）、PBS、RNase-free水、Trizol、 氯仿、异丙醇、75%乙醇。

2.所需仪器：磁力架、混匀仪、低温离心机、超声波破碎仪。

使用说明

I 注意事项

1. 请勿干燥、冷冻或剧烈涡旋磁珠，禁止长时间置于磁场，这些操作可能会引起磁珠聚团，降低结合活性。

2. 为保证磁珠均匀分布，请在使用前通过反复颠倒、轻微涡旋彻底混匀磁珠。

3. 请务必使用无 RNase 的实验材料：如离心管、枪头等。

4. 实验的具体样品量和孵育时间依赖于每个特定体系，可能需要优化才能得到最大产量。

5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

说明书：F1514 ChainFree Flag 标签 RIP 试剂盒（植物）.pdf (203.31 K)