冷冻保存哺乳动物细胞在生物学研究中非常有价值和普遍。为了防止技术原因（培养操作）使细胞污染或物理原因（培养箱故障）使长期培养功亏一篑。此外，长期多次的培养和传代，导致细胞在遗传学性状上的老化和分化都是促使在接收或生成新细胞系后首要考虑的最佳策略就是冻存细胞。低温冻存对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。细胞深低温保存的基本原理是：在-70℃以下时，细胞内的酶活性均己停止，即代谢处于完全停止状态，故可以长期保存。细胞低温保存的关键，在于通过0℃到-20℃阶段的处理过程。在此温度范围内，冰晶呈针状，极易招致细胞的严重损伤。

如何减少或者避免冰晶形成，如同冻存细菌时用的甘油，DMSO（二甲基亚砜）是一种渗透性保护剂，能够降低细胞冰点，减少冰晶的形成，减轻自由基对细胞损害，改变生物膜对电解质、药物、毒物和代谢产物的通透性。冻存液中加入后可以使溶液冰点降低，加之在缓慢冻结条件下，细胞内的水分逐渐透出，从而减少了冰晶的形成，从而避免细胞的损伤。这就是为什么低温冻存细胞时为什么要采用慢冻的一个重要原因。

一旦从生长培养基转移到冷冻培养基中，就要执行慢冻的过程。尽管冷冻细胞系是通常执行的程序，但是当没有合适的冷冻器具时，或者由于存在血清，额外洗涤或操作不当时，就会出现问题。当然，这个问题是在细胞复苏（快融）后才发现的。发现复苏后的细胞大部分或者全部都是死细胞，甚至还有不容易发现的整个冻存过程的不当导致的细胞分化。所有这些问题和担忧，都可以通过BambankerTM细胞冷冻培养基试剂家族来解决。 BambankerTM独特的成分允许直接将细胞在-80°C或液氮中冷冻保存，从而避免了对额外设备的需求，并且也避免了耗时且复杂的梯度逐渐冷冻方案。

产品特色

• 可在-80°C或-196°C的温度下长期冻存细胞

• 冷冻保存ES细胞和iPS细胞的理想选择

• 用人血清白蛋白制成-无其他动物成分

• 细胞复苏后的活率高

• 即用型冷冻介质–无需程序或顺序降温冷冻

• 无血清–无污染风险

• 保质期长

冷冻保存ES和iPS细胞的新希望（A new hope for the cryopreservation of ES and iPS cells）

灵长类胚胎干细胞（ES）和诱导多能干细胞（iPS）对冷冻保存极为敏感，与鼠类或其他细胞相比，冷冻保存存在许多困难。 目前，玻璃化方法被认为适用于灵长类ES / iPS细胞，尽管使用DMSO的慢速冷冻方法已广泛用于多种细胞系。 玻璃化是指将冷冻介质快速冷却至玻璃状结晶状态。 玻璃化方法需要无懈可击的时机，高水平的技能，并且仍然会产生较差的结果。 另外，该方法显示出对干冰运输的敏感性。 为了解决这些问题，Nippon Genetics已经开发了新的冷冻培养基BambankerTM HRM。

将人iPSC 201B7细胞冷冻保存在BambankerTM HRM中，常规玻璃化培养基或10％DMSO /培养基中。 3天后，根据Protocol将细胞解冻，然后铺板。 含有10％DMSO的培养基只能回收小菌落，这表明存活率较低，而使用BambankerTM HRM可以回收几乎与玻璃化冷冻保存液相同大小的大菌落。 这些结果表明，使用BambankerTM HRM可以达到与玻璃化保存解决方案相同的存储效率，并且具有易于处理的额外优势。

人iPS细胞冷冻保存效率的比较。数据由美国公司日本东京研究中心Hasumi国际研究基金会提供。

比较了BambankerTMHRM和其他两冻存工业（供应商T，供应商S）对于普通绒猴成纤维细胞的储藏效率。 将成纤维细胞在6 cm培养皿中培养，直至融合度达到90-100％。 将细胞在-80℃冷冻两个月。每种保存溶液在融化后分别在24和48 h拍摄显微照片。 确定死细胞的百分比。 BambankerTM HRM的存活率最高，其次是供应商T的冻存液， 供应商S的冻存液有最低的存活率。 仅使用BambankerTM HRM储存的细胞显示出足够的数量，因此可以直接用于iPS细胞诱导。

数据由京都大学灵长类研究所，分子生理学研究部提供

血清增加了长期储存的差异（Serum adds variation to long-term storage）

所有BambankerTM产品均不含血清。含有血清的冷冻保存培养基具有回收率波动和成分不确定的缺点。冻存于含血清的培养基中的细胞的实验可重复性可能会受到批次之间血清差异的影响，因为蛋白质和其他生物分子的组成和浓度会随每批血清而变化。解冻和使用这种含血清培养基的细胞时，可能会导致问题。因为BambankerTM的每种成分都经过精确定义，因此您可以放心，在不同时间存储的细胞都将有一致的效率。

BambankerTM可防止不期望的分化（BambankerTM prevents undesired differentiation） 

不期望的细胞分化也可能是冷冻细胞长期保存的一个问题。 所有Bambanker试剂均旨在最大程度地减少此问题。 对于特别麻烦的细胞，Bambanker不含DMSO的配方经过特殊配制，可防止可能与含DMSO的冷冻保存试剂相关的问题。 因此，请加入越来越多的实验室的选择，使用Bambanker保护其细胞系！

多能干细胞的细胞活力和ALP染色 

                    上排：解冻两天后检测到大量细胞。 解冻后细胞没有形态变化 

                    下排：BambankerTM不会引起细胞分化，因为所有冻结的干细胞仍会产生高水平的碱性磷酸酶，这是多能干细胞的报告基因

细胞冻存液家族（Family of BambankerTM）