淀粉测定方法分为酸水解法和酶分析法。酸水解只能应用干纯淀粉样品。酶分析方法在前外理步骤淀粉凝胶化、液化和糊化糊精水解成葡萄糖，葡萄糖测定步骤等方面存在不同。AACC76-11法采用淀粉在高压蒸汽灭菌锅中及含水的条件下凝胶化，并用淀粉葡糖苷酶将淀粉转化为葡萄糖，再测定葡萄糖含量，采用AACC76-11法会导致许多样品和材料中包括高直链淀粉玉米淀粉和谷物制品淀粉含量检测结果偏低。近来，我们将检测方法进行了改进，使耐热a-淀粉酶和淀粉葡糖苷酶可以在相同的pH(pH5.0)下进行孵育，这样简化了测定步骤，并将麦芽酮糖生成的可能性降到最低。淀粉总量试剂盒可测定大部分食品、饲料、植物和谷物制品(天然或加工过的)对于大部分样品(如小麦粉)样品中的淀粉在孵育中(大约100℃并加入耐热a-淀粉酶)会完全溶解含有大量抗性淀粉的样品(如高直链玉米淀粉)需用1.7M  NaOH或热DMSO进行预溶解。含有可溶性淀粉或麦芽糊精的样品，不需要用耐热-淀粉酶处理。

产品性能

特异性:可用于测定-葡聚糖(包括淀粉、糖原、植物糖原和非抗性麦芽糊精)

灵敏度:最小吸光度差异为0.010吸光度单位。这相当于当样品体积为100mL时，D-葡萄糖的浓度为1.0mg/L或淀粉浓度为0.9mg/L。

检测限:2.0mgD-葡萄糖(18mg淀粉)/L(在最大样品体积为100mL，吸光度差异为0.020时得到)。

检测范围:5-100ugD-葡萄糖，重复检测同一样品溶液其吸光度值会有0.005-0010吸光度单位的差异，这相当于样品体积为1.00mL时，样品溶液中D-葡萄糖浓度0.05-10mg/L。如果样品经过稀释，计算结果时需要乘以相应的稀释系数(F)，如果在样品制备阶段，样品称量时，如10g/L，可能会产生0.02-0.05g/100g的差异。

检测原理

耐热a-淀粉酶将淀粉水解为可溶性有支链和无支链的麦芽糊精(1)

(a-淀粉酶，pH7.0或50-100℃)

(1)淀粉+H₂O                                   麦芽糊精

如果需要(如含大量抗性淀粉的样品)，可向样品中加入的2MKOH并搅拌，在4℃下使抗性淀粉预溶解，然后用醋酸钠缓冲液中和，再用-淀粉酶处理(2)。也可在100℃下，用的DMSO溶解。

(KOH再中和+a-淀粉酶）

(2) 抗性淀粉+H₂O                               麦芽糊精

淀粉葡糖苷酶(AMG)将麦芽糊精定量水解成D-葡萄糖

(AMG)

(3)麦芽糖精               D-葡萄糖

D-葡萄糖被氧化成D-葡萄酸盐，并释放一摩尔H₂O₂，再用过氧化物酶催化H₂O₂反应，产生的昆亚胺染料含量用比色法测定。

(葡萄糖氧化酶)

(4) D-葡萄糖+O₂+ H₂O                     D-葡萄糖酸盐+H₂O₂

(过氧化物酶)

(5)2H₂O+对羟基苯甲酸+4-氨基安替比林                   昆亚胺染料+4H₂O

如果样品中含高水平的D-葡萄糖和麦芽糊精，可在测定前用含水乙醇(80%v/v)处理。一个样品可以在70分钟完成。2小时内可以完成20个样品检测。

保存条件：

未配制前在规定存储条件下6个月内有效，配制使用后在规定存储条件下3个月内有效。（各组分详细储存条件见瓶身）

试剂盒组成与配置：

1. 所需的仪器和用品：

2. 可见分光光度计、10mm玻璃比色皿、水浴锅、可调式移液器、冰、离心机、开水浴、磁力搅拌器

2. 需配试剂：

a、 醋酸钠缓冲液（100 mM，pH 5.0）加二水合氯化钙（5 mM）：在900 mL蒸馏水中加入5.8 mL冰醋酸（1.05 g/mL）。通过添加1 M（4 g/100 mL）氢氧化钠溶液（需要大约30 mL），将pH值调节到5.0，后加入0.74 g二水合氯化钙并溶解，将容量调节至1L，并在4°C下储存缓冲液。（在4°C下稳定>6个月）

b、 醋酸钠缓冲液（200mm，pH 4.5）加二水合氯化钙（5 mM）：向900 mL蒸馏水中添加11.6 mL冰醋酸（1.05 g/mL），加入0.74 g二水氯化钙并溶解，通过添加1 M（4 g/100 mL）氢氧化钠溶液（需要大约60 mL），将pH值调整为4.5，将容液定容至1L。（在4°C下稳定>6个月）

c、 醋酸钠缓冲液（600 mM，pH 3.8）加二水合氯化钙（5 mM）：向1600 mL蒸馏水中添加69.6 mL冰醋酸（1.05 g/mL），并使用4 M氢氧化钠将pH值调节至3.8，再添加1.48 g二水氯化钙并溶解，用蒸馏水将体积调节到2L。（室温下稳定>12个月）

d、 氢氧化钠溶液（1.7 M）：称取68g氢氧化钠，加入900mL去离子水，搅拌溶解，将容量调整为1L并储存在密封容器中。（在室温下稳定2年以上）

e、 MOPS缓冲液(50mM,pH7.0)+氯化钙(5mM) +叠氮化钠(0.02%)（仅用于c和d分析样品）

取11.55g MOPS(钠盐, Sigma cat. M-9381)加入900mL蒸馏水, 用1M(10%V/V)HCl调节pH到7.0（大约需要17mL）， 称取二水合氯化钙0.74g和叠氮化钠0.2g 完全溶解, 然后调整到1L。（4°C下保存6个月）            注：在调整pH值之前，不得添加叠氮化钠，叠氮化钠酸化释放出有毒气体。

淀粉含量测定：

（a） 不含抗性淀粉的谷物和食品中淀粉的测定（推荐程序：pH值5.0的所有培养）

1.碾磨谷物、植物或食品，以通过0.5毫米的筛网；

2.准确称取100 mg供试品，一式两份（一份作为样品空白）放入试管中并记录准确的重量，轻敲试管，使样本落到试管底部；

3.向两根试管中加入10mL醋酸钠缓冲液（100mM，pH 5.0）和氯化钙（5mM），在涡流混合器上用力搅拌管子5秒；

4.向其中一个试管（样品管）中添加0.1 mL未稀释的试剂一，向第二根试管（样品空白）中加入0.1mL醋酸钠缓冲液（100mM，pH 5.0）和氯化钙（5mM）；

5.旋涡管3秒，松散地盖住管，立即将其转移到沸水浴中并启动计时器，大约2分钟后，拧紧瓶盖，在涡流混合器上用力混合试管内容物，再过5分钟后，再次将试管内容物旋涡5秒，然后将试管放回沸水浴中15分钟，从沸水浴中取出试管，在涡流混合器上剧烈搅拌5秒钟。将管子放在50°C的水浴中，使其平衡到超过5分钟的温度；

6.向其中一个试管（样品管）中添加0.1 mL未稀释试剂二，涡流3秒。向第二根试管（样品空白）中添加0.1 mL醋酸钠缓冲液（100 mM pH 5.0）和氯化钙（5 mM），在50°C下培养试管30分钟，无需进一步混合；

7. 从水浴槽中取出管子，使其冷却到室温10分钟以上，将管子倒置几次，以确保盖子内侧的冷凝水与管内的液体混合；

8. 向试管（样品和空白样品）内各取出2.0 mL溶液转移到微型胶管中，并以13000 rpm的转速离心试管5分钟并静置5分钟，准确取1.0 mL的上清液转移到7mL试管中，加入4 mL醋酸钠缓冲液（100 mM，pH 5.0）和氯化钙（5 mM），并混合内容物；

9.  准确取出每份试管内（样品和空白样品）的溶液的0.1 mL；

10.  添加3.0 mL GOPOD试剂，在50°C下培养20分钟，反应结束后将3mL液体转移至玻璃比色皿中，于510nm处读数；

同时孵化：

血糖控制：0.1 mL葡萄糖标准溶液（1.0 mg/mL）加3.0 mL GOPOD试剂，一式四份；

试剂空白：0.1 mL乙酸钠缓冲液（100 mM，pH 5.0）加氯化钙（5 mM）和3.0 mL GOPOD试剂，一式两份。

11.    计算淀粉含量。

注：对于本提取方案，最终提取体积（EV）=10.2   稀释度（D）=1、5或11

注1：如果样品的吸光度值小于0.100，分析离心样品溶液（步骤8），无需进一步稀释。如果吸光度值大于1.20，则将1.0 mL离心样品溶液加入10.0 mL醋酸钠缓冲液（100 mM，pH 5.0）加氯化钙（5 mM）混合均匀，然后取出0.1 mL等分试样，使用GOPOD试剂进行分析。对于淀粉含量小于1%（w/w）的样品，将样品尺寸增加至500 mg，并分析0.1 mL未稀释样品溶液。（稀释度（D）=1、5或11）

注2：当分析草和青贮饲料等纤维样品时，使用搅拌机研磨样品，研磨约60秒（直到样品均匀为止）。分析500 mg样品（精确称重）。根据实施例“a”培养，但在100°C下用耐热α-淀粉酶将培养时间延长至60分钟。在使用AMG培养并冷却至室温后，对于含有约20-30%淀粉的青贮饲料样品，在蒸馏水中稀释20倍的小份（1 mL），充分混合，以13000 rpm的转速离心分离小份（2 mL）5分钟，并且用GOPOD试剂培养0.1 mL等分试样，一式两份。（稀释度（D）=20）

（b） 含抗性淀粉样品总淀粉含量的测定（RTS-NaOH程序-推荐）。

1.准确称取100 mg试样，一式两份，放入试管中，并记录准确的重量，轻敲试管，使样本落到试管底部；

2.将80%的乙醇完全分散在混合管中，这是一个非常重要的步骤；

3.使用移液器添加2ml  1.7M氢氧化钠溶液，并在涡流混合器上搅拌试管内容物15秒，将试管放在冰水浴架上的磁力搅拌器上搅拌15分钟。在此期间，也间歇地在涡流混合器上剧烈搅拌管内的物质2-3次,确保样品浆液中没有结块；

4.使用移液器添加8 mL醋酸钠缓冲液（600 mM，pH 3.8）和氯化钙（5 mM）,在涡流混合器上搅拌管子,确保pH值约为5.0；

5.立即在样品管中添加0.1 mL未稀释的试剂一，然后再添加0.1 mL试剂二。向第二根试管（样品空白）中添加0.2 mL醋酸钠缓冲液（100 mM，pH 5.0）和氯化钙（5 mM），盖住两个试管并使内容物涡流3秒；

6.试管在50°C下培养30分钟；

7.从水浴槽中取出管子，让它们冷却到室温，将管子倒置几次，以确保盖子内侧的冷凝水与管内的液体混合；

8. 向试管（样品和空白样品）内各取出2.0 mL溶液转移到微型胶管中，并以13000 rpm的转速离心试管5分钟并静置5分钟，准确取1.0 mL的上清液转移到7mL试管中，试管中含有4 mL醋酸钠缓冲液（100 mM，pH 5.0）和氯化钙（5 mM），并混合内容物；

9.  准确取出每份试管内（样品和空白样品）的溶液的0.1 mL；

10. 添加3.0 mL GOPOD试剂，在50°C下培养20分钟，反应结束后将3mL液体转移至玻璃比色皿中，于510nm处读数。

同时孵化：

血糖控制：0.1 mL葡萄糖标准溶液（1.0 mg/mL）加3.0 mL GOPOD试剂，一式四份。

试剂空白：0.1 mL乙酸钠缓冲液（100 mM，pH 5.0）加氯化钙（5 mM）和3.0 mL GOPOD试剂，一式两份。

注：对于本提取方案，最终提取体积（EV）=10.4   稀释度（D）=1、5或11

注1：如果样品的吸光度值小于0.100，分析离心样品溶液（步骤8），无需进一步稀释。如果吸光度值大于1.20，则将1.0 mL离心样品溶液加入10.0 mL醋酸钠缓冲液（100 mM，pH 5.0）加氯化钙（5 mM）混合均匀，然后取出0.1 mL等分试样，使用GOPOD试剂进行分析。对于淀粉含量小于1%（w/w）的样品，将样品尺寸增加至500 mg，并分析0.1 mL未稀释样品溶液。稀释度（D）=1、5或11

（c） 不含抗性淀粉、D-葡萄糖和/或麦芽糊精的谷物和食品中淀粉的测定（AOAC官方方法996.11）。

1.碾磨谷物、植物或食品，以通过0.5毫米的筛网；

2.准确称取100 mg试样，放入试管中，并记录准确的重量，轻敲试管，使样本落到试管底部；

3.加入0.2ml水乙醇（80%v/v）润湿样品并协助分散，在涡流混合器上搅拌管子；

4.立即添加3 mL稀释后的试剂一（将试剂一用MOPS缓冲液（50 mM，pH 7.0）和氯化钙（5 mM）稀释30倍），将试管放入沸水浴中孵育6分钟，2分钟、4分钟和6分钟后剧烈旋转（以确保完全均匀）；

5. 将试管置于50°C的槽中，温育5min，加入4 mL醋酸钠缓冲液（200 mM，pH 4.5）和氯化钙（5 mM），然后加入0.1mL试剂二，在涡流混合器上搅拌试管，并在50°C下培养30分钟；

6. 将试管中的全部内容物转移到100 mL容量瓶中（有漏斗辅助），使用洗瓶彻底冲洗试管内的内容物，用醋酸钠缓冲液（200 mM，pH 4.5）和氯化钙（5 mM）调节至体积，并将内容物充分混合；

7. 向试管内取出2.0 mL溶液转移到微型胶管中，并以13000 rpm的转速离心试管5分钟并静置5分钟；

8.准确取出试管内的溶液的0.1 mL；

9. 添加3.0 mL GOPOD试剂，在50°C下培养20分钟，反应结束后将3mL液体转移至玻璃比色皿中，于510nm处读数；

同时孵化：

血糖控制：0.1 mL葡萄糖标准溶液（1.0 mg/mL）加3.0 mL GOPOD试剂，一式四份；

试剂空白：0.1 mL乙酸钠缓冲液（100 mM，pH 5.0）加氯化钙（5 mM）和3.0 mL GOPOD试剂，一式两份。

注：对于本提取方案，最终提取体积（EV）=100  稀释度（D）=1

（d） 测定含有抗性淀粉但不含d-葡萄糖和/或麦芽糊精的样品的总淀粉含量（DMSO格式-AOAC官方方法996.11）。

1.碾磨谷物、植物或食品，以通过0.5毫米的筛网；

2.将研磨好的样品（约100mg，精确称重）添加到试管中；

3.用0.2 mL含水乙醇（80%v/v）润湿，以帮助分散，并在涡流混合器上搅拌管；

4.立即加入2mL二甲基亚砜（DMSO），并在涡流混合器上搅拌试管，将试管放入沸水浴中，5分钟后取出；

5.立即添加3 mL稀释后的试剂一（将试剂一用MOPS缓冲液（50 mM，pH 7.0）和氯化钙（5 mM）稀释30倍），将试管放入沸水浴中孵育6分钟，2分钟、4分钟和6分钟后剧烈旋转（以确保完全均匀）；

6. 将试管置于50°C的槽中；加入4 mL醋酸钠缓冲液（200 mM，pH 4.5）和氯化钙（5 mM），然后加入0.1mL试剂二，在涡流混合器上搅拌试管，并在50°C下培养30分钟；

7. 将试管中的全部内容物转移到100 mL容量瓶中（有漏斗辅助）。使用洗瓶彻底冲洗试管内的内容物，用醋酸钠缓冲液（200 mM，pH 4.5）和氯化钙（5 mM）调节至体积，并将内容物充分混合；

8. 向试管内取出2.0 mL溶液转移到微型胶管中，并以13000 rpm的转速离心试管5分钟并静置5分钟；

9.准确取出试管内的溶液的0.1 mL；

10.    添加3.0 mL GOPOD试剂，在50°C下培养20分钟，反应结束后将3mL液体转移至玻璃比色皿中，于510nm处读数。

同时孵化：

血糖控制：0.1 mL葡萄糖标准溶液（1.0 mg/mL）加3.0 mL GOPOD试剂，一式四份。

试剂空白：0.1 mL乙酸钠缓冲液（100 mM，pH 5.0）加氯化钙（5 mM）和3.0 mL GOPOD试剂，一式两份。

注：对于本提取方案，最终提取体积（EV）=100  稀释度（D）=1

（e） 测定含有D-葡萄糖和/或麦芽糊精的样品中淀粉的建议程序.用酒精洗涤去除D-葡萄糖和麦芽糊精。

[注：麦芽糊精在乙醇水溶液中的溶解度主要取决于麦芽糊精的DP范围、最终乙醇浓度和溶液温度]。

1.碾磨谷物、植物或食品，以通过0.5毫米的筛网；

2.向玻璃离心管（16 x 100 mm；14 mL容量）中添加研磨样品（约100 mg，精确称重）；

3. 添加5.0 mL含水乙醇（80%v/v）并在80-85°C下培养5分钟，在涡流搅拌器上混合内容物，并添加另5 mL 80%v/v水乙醇；

4.在台式离心机上，以3250 rcf离心试管10分钟，丢弃上清液；

5.加5 mL 80%v/v含水乙醇中重新悬浮颗粒，并在涡流混合器上搅拌，再加入5ml 80%v/v含水乙醇，倒置混合，按照步骤4离心，并小心地倒出上清液；

6.立即添加3 mL稀释后的试剂一（将试剂一用MOPS缓冲液（50 mM，pH 7.0）和氯化钙（5 mM）稀释30倍），将试管放入沸水浴中孵育6分钟，2分钟、4分钟和6分钟后剧烈旋转（以确保完全均匀）；

7. 将试管置于50°C的槽中，温育5min，加入4 mL醋酸钠缓冲液（200 mM，pH 4.5）和氯化钙（5 mM），然后加入0.1mL试剂二，在涡流混合器上搅拌试管，并在50°C下培养30分钟；

8. 将试管中的全部内容物转移到100 mL容量瓶中（有漏斗辅助），使用洗瓶彻底冲洗试管内的内容物，用醋酸钠缓冲液（200 mM，pH 4.5）和氯化钙（5 mM）调节至体积，并将内容物充分混合；

9. 向试管内取出2.0 mL溶液转移到微型胶管中，并以13000 rpm的转速离心试管5分钟并静置5分钟；

10.准确取出试管内的溶液的0.1 mL；

11.  添加3.0 mL GOPOD试剂，在50°C下培养20分钟，反应结束后将3mL液体转移至玻璃比色皿中，于510nm处读数。

同时孵化：

血糖控制：0.1 mL葡萄糖标准溶液（1.0 mg/mL）加3.0 mL GOPOD试剂，一式四份；

试剂空白：0.1 mL乙酸钠缓冲液（100 mM，pH 5.0）加氯化钙（5 mM）和3.0 mL GOPOD试剂，一式两份。

注：对于本提取方案，最终提取体积（EV）=100  稀释度（D）=1

（f） 淀粉以可溶性或悬浮形式存在的样品中淀粉的测定

1.通过在旋涡混合器上搅拌或通过倒置，彻底混合样品内容物。如有必要，加热或均质样品以获得均匀悬浮液；

2.立即使用移液器将样品和样品空白转移到试管中，在每根试管中加入5ml醋酸钠缓冲液（200mm，pH4.5）和氯化钙（5mm），在涡流混合器上用力搅拌管子5秒；

3.   向其中一个试管（样品管）中添加0.1 mL未稀释的试剂一，向第二根试管（样品空白）中加入0.1mL醋酸钠缓冲液（100mM，pH 5）和氯化钙（5mM）；

4.   旋涡管3秒，松散地盖住管，立即将其转移到沸水浴中并启动计时器。大约2分钟后，拧紧瓶盖，在涡流混合器上用力混合试管内容物。再过5分钟后，再次将试管内容物旋涡5秒，然后将试管放回沸水浴中15分钟，从沸水浴中取出试管，在涡流混合器上剧烈搅拌5秒钟。将管子放在50°C的水浴中，使其平衡到超过5分钟的温度；

5.    向其中一个试管（样品管）中添加0.1 mL未稀释试剂二，涡流3秒，向第二根试管（样品空白）中添加0.1 mL醋酸钠缓冲液（100 mM pH 5.0）和氯化钙（5 mM），在50°C下培养试管30分钟，无需进一步混合；

6.    从水浴槽中取出管子，使其冷却到室温10分钟以上。将管子倒置几次，以确保盖子内侧的冷凝水与管内的液体混合；

8.  向试管（样品和空白样品）内各取出2.0 mL溶液转移到微型胶管中，并以13000 rpm的转速离心试管5分钟并静置5分钟，准确取1.0 mL的上清液转移到7mL试管中，试管中含有4 mL醋酸钠缓冲液（100 mM，pH 5.0）和氯化钙（5 mM），并混合内容物；

9.  准确取出每份试管内（样品和空白样品）的溶液的0.1 mL；

10.  添加3.0 mL GOPOD试剂，在50°C下培养20分钟，反应结束后将3mL液体转移至玻璃比色皿中，于510nm处读数。

同时孵化：

血糖控制：0.1 mL葡萄糖标准溶液（1.0 mg/mL）加3.0 mL GOPOD试剂，一式四份。

试剂空白：0.1 mL乙酸钠缓冲液（100 mM，pH 5.0）加氯化钙（5 mM）和3.0 mL GOPOD试剂，一式两份。

        稀释样品体积（DSV）=10.2 mL  释度（D）=1、5或11  样品体积（SV）=5mL

注1：如果样品的吸光度值小于0.100，分析离心样品溶液（步骤8），无需进一步稀释。如果吸光度值大于1.20，则将1.0 mL离心样品溶液加入10.0 mL醋酸钠缓冲液（100 mM，pH 5.0）加氯化钙（5 mM）混合均匀，然后取出0.1 mL等分试样，使用GOPOD试剂进行分析。对于淀粉含量小于1%（w/w）的样品，将样品尺寸增加至500 mg，并分析0.1 mL未稀释样品溶液。稀释度（D）=1、5或11

（g） 悬浮态含抗性淀粉样品中淀粉含量的测定

1.通过在旋涡混合器上搅拌或通过倒置，彻底混合样品内容物。如有必要，可获得均匀悬浮液；

2.立即使用移液器分试样一式两份移入两个试管中，在涡流混合器上搅拌试管内容物15秒，将试管放在冰水浴架上的磁力搅拌器上搅拌15分钟，在此期间，也间歇地在涡流混合器上剧烈搅拌管中的内容物2-3次，确保样品浆液中没有结块；

3.使用移液器添加8 mL醋酸钠缓冲液（600 mM，pH 3.8）和氯化钙（5 mM），在涡流混合器上搅拌管子，确保pH值约为5.0；

4.立即样品管中添加0.1 mL未稀释的试剂一，然后再添加0.1 mL试剂二，向第二根试管（样品空白）中添加0.2 mL醋酸钠缓冲液（100 mM，pH 5.0）和氯化钙（5 mM），盖住两个试管并使内容物涡流3秒；

5.试管在50°C下培养30分钟；

6.从水浴槽中取出管子，让它们冷却到室温，将管倒置几次，以确保盖子内侧的冷凝水与管内的液体混合；  

7.向试管（样品和空白样品）内各取出2.0 mL溶液转移到微型胶管中，并以13000 rpm的转速离心试管5分钟并静置5分钟，准确取1.0 mL的上清液转移到7mL试管中，试管中含有4 mL醋酸钠缓冲液（100 mM，pH 5.0）和氯化钙（5 mM），并混合内容物；

8.  准确取出每份试管内（样品和空白样品）的溶液的0.1 mL；

9.  添加3.0 mL GOPOD试剂，在50°C下培养20分钟，反应结束后将3mL液体转移至玻璃比色皿中，于510nm处读数。

同时孵化：

血糖控制：0.1 mL葡萄糖标准溶液（1.0 mg/mL）加3.0 mL GOPOD试剂，一式四份。

试剂空白：0.1 mL乙酸钠缓冲液（100 mM，pH 5.0）加氯化钙（5 mM）和3.0 mL GOPOD试剂，一式两份。

      稀释样品体积（DSV）=12.2 m      稀释度（D）x 1、5或11；样品体积（SV）=2 mL

计算：

1.固体样品的计算（mg）：

淀粉，%  =  ΔA × F×（EV÷0.1）×（1÷1000）×D×（100÷W）×（162÷180）

=ΔA x F x EV x D x 0.90

             W

ΔA=相当于试剂空白读取的吸光光度值(反应) ；       

F =吸光光度值转换为葡萄糖(ug)的因子（100(D-葡萄糖的重量ug÷100μgD-葡萄糖的吸光光度值）；

EV=最终体积样品提取量:程序（a）为10.2 mL，程序（b）为10.4mL，（c）和（d）为100mL;                  0.1=用于检测的样品体积；      （1÷1000）=1从ug到mg的转换；

（100÷W）=一定重量干粉中淀粉含量以百分比表述的因子； （162÷180）=淀粉中游离的D-葡萄糖转化为D-葡萄糖酐的的因子180；               D=样品溶液的进一步稀释（未稀释或稀释5倍或11倍）     

淀粉%W/W(干重)=淀粉%W/W(上述算法结果)x 100÷（100-含水量(%W/W))

2.液体样品的计算（mg/100 mL）：

淀粉 = ΔA x F x DSV  x 100  x  1 x  162  x D

SV    0.1   1000   180

= ΔA x F x DSV÷SV x 0.9

ΔA=相当于试剂空白读取的吸光光度值(反应) ；       

F =吸光光度值转换为葡萄糖(ug)的因子（100(D-葡萄糖的重量ug÷100μgD-葡萄糖的吸光光度值）；

DSV=稀释样品体积（即加入醋酸盐缓冲液+α-淀粉酶和AMG后的样品体积）；

SV=分析用样品的体积（例如（f）为5 mL，示例（g）为2 mL；  100=换算成100mL样品体积。

0.1=用于检测的样品体积；           （1÷1000）=1从ug到mg的转换；

（162÷180）=淀粉中游离的D-葡萄糖转化为D-葡萄糖酐的的因子180；               

D=样品溶液的进一步稀释（未稀释1倍或稀释5倍或11倍）     

淀粉（g/100g样品）=mg/100mL×100/样品干重（mg/mL)

注意事项：

1、二甲亚砜作为皮肤刺激物，因此应谨慎使用。它通过皮肤吸收，会对皮肤和眼睛造成刺激。使用时穿戴防护品并避免溅出溶剂，尽可能在通风柜中使用。