一氧化氮（Nitric oxide，NO）含量检测试剂盒 (分光光度法50T/48S)
| 货号 | SH0621 | 售价（元） | 408 |
| 规格 | 50T/48S | CAS号 |
- 产品简介
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货号 |
名称 |
规格 |
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SH0621 |
一氧化氮（Nitric oxide，NO）含量检测试剂盒 (分光光度法50T/48S) |
50T/48S |
测定意义：
NO（Nitric Oxide，NO）广泛分布于生物体内神经、循环、呼吸、消化、泌尿生殖等系统中，特别是神经组织中较丰富。它作为细胞间及细胞内的信息物质，发挥信号传递的作用，是一种新型的生物信使分子，在机体的生理、病理过程中起着重要的作用。
测定原理：
NO在体内或水溶液中极易氧化生成NO2—，在酸性条件下，NO2—与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物，进一步与萘基乙烯基二胺偶合，产物在550nm处有特征吸收峰，测定其吸光值，可以计算NO含量。
组成：
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产品名称 |
SH0621-50T/48S |
Storage |
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提取液：液体 |
50ml |
4℃ |
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试剂一：液体 |
15ml |
4℃避光 |
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试剂二：粉剂 |
15ml |
4℃避光 |
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说明书 |
一份 |
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试剂二：液体15ml×1瓶，4℃避光保存。（用之前60℃加热震荡15min）
自备仪器和用品：
天平、研钵或匀浆器、可见分光光度计、1ml玻璃比色皿、蒸馏水。
样品处理：
1. 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液）进行冰浴匀浆。10000g，4℃离心15min，取上清，置冰上待测。
2. 细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1ml提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000g，4℃，离心15min，取上清置于冰上待测。
3. 体液和培养液等其它液态样品：直接测定。
测定步骤和操作表：
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空白管 |
测定管 |
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样品（μl） |
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400 |
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提取液（μl） |
400 |
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试剂一（μl） |
250 |
250 |
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试剂二（μl） |
250 |
250 |
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混匀，室温静置15min， 1ml玻璃比色皿，测定A550，ΔA=A测定-A空白 |
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NO含量计算
标准曲线回归方程为：y= 0.016x -0.0103，R2= 0. 9986
1、组织样品：
（1）按样本质量计算
NO含量（μmol/g 鲜重）=（ΔA +0.0103）÷0.016×V反总÷（V样÷V样总×W）×10-3
= 0.14×（ΔA +0.0103）÷W
（2）按样本蛋白浓度计算
NO含量（μmol/mg prot）=（ΔA +0.0103）÷0.016×V反总÷（V样×Cpr）×10-3
= 0.14×（ΔA +0.0103）÷Cpr
2、细胞：
NO含量（μmol/104 cell）=（ΔA +0.0103）÷0.016×V反总÷（V样÷V样总×细胞数量）×10-3
= 0.14×（ΔA +0.0103）÷细胞数量（万个）
3、其他样品：
NO含量（μmol/L）=（ΔA +0.0103）÷0.016×V反总÷V样
= 140×（ΔA +0.0103）
V反总：反应总体积，0.9ml；V样：反应中样品体积，0.4ml；V样总：加入提取液体积，1ml；W：样品质量，g；Cpr：蛋白浓度，mg/ml