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甘油三酯(TG)含量测定试剂盒(分光光度法50T/48S)

货号 SH0468 售价(元) 600
规格 50T/48S CAS号
  • 产品简介
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货号

名称

规格

SH0468

甘油三酯(TG)含量测定试剂盒(分光光度法50T/48S)

50管/48样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义:

TG是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不仅是细胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。

测定原理:

用异丙醇提取TG,脂蛋白酯酶水解TG生成甘油和脂肪酸(FFA),甘油与三磷酸腺苷在甘油激酶和磷酸甘油氧化酶催化下生成H2O2过氧化物酶催化过氧化氢氧化4-氨基安替比林偶联酚,生成有色化合物,在505 nm处有特征吸收峰。

组成:

产品名称

SH0468-50T/48S

Storage

试剂一:液体

60 ml

4℃

试剂二:液体

26 ml

4℃

试剂三:液体

26 ml

    4℃避光

说明书

一份

自备仪器和用品:

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水

TG的提取:

1、 组织中TG的提取:按照组织质量(g):试剂一体积(ml)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml试剂一)进行冰浴匀浆8000g4℃离心10min,取上清,即TG待测液。

2、细胞、细菌中TG的提取:先收集400-500万细胞或细菌到离心管内,离心后弃上清,1ml试剂一,超声波破碎1min(强度20%,超声2s,停1s8000g4℃离心10min,取上清,即TG待测液。

3、血清(浆)样品:直接测定。

测定操作:

可见分光光度计预热30min,调节波长到505 nm

试剂(μl

空白管

测定管

样本

 

50

试剂一

50

 

试剂二

475

475

试剂三

475

475

混匀,室温下静置20min,于505 nm波长处读取吸光值,记为A空白和A测定,△A=A测定-A空白。空白管只需测一管。

计算公式:

标准曲线:y = 0.6522x - 0.0199 R2 = 0.9979x标准品浓度(mg/ml y:吸光值差值ΔA

1. 血清(浆)中甘油三酯含量计算:

TG含量(mg/ml=ΔA+0.0199÷0.6522=1.533×ΔA+0.0199

2. 组织、细菌或细胞中甘油三酯含量计算:

(1)按样本蛋白浓度计算

TG含量(mg/ mg prot= (ΔA+0.0199)÷0.6522×V÷(Cpr×V样)=1.533×ΔA+0.0199÷Cpr

(2)按样本质量计算

TG含量(mg/ g 鲜重=ΔA+0.0199÷0.6522×V÷(W×V÷V样总)=1.533×ΔA+0.0199÷ W

V样:加入样本体积,0.01 mlV样总:加入试剂一体积,1 mlW:样本质量,g

Cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml

注意事项:

1. 试剂盒中有易挥发性物质,实验过程中需佩戴手套和口罩,试剂瓶盖打开后应该及时盖紧。

2. 最低检出限为100μg/ml