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土壤几丁质酶(S-Chitinase)检测试剂盒(分光光度法50T/24S)

货号 SH0369 售价(元) 816
规格 50T/24S CAS号
  • 产品简介
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货号

名称

规格

SH0369

土壤几丁质酶(S-Chitinase)检测试剂盒(分光光度法50T/24S)

50管/24样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义:

几丁质主要存在于虾、蟹、昆虫等甲壳类动物的外壳与软体动物的器官(例如乌贼的软骨),以及真菌类的细胞壁中,而几丁质酶(EC 3.2.1.14)可催化几丁质水解,具有抵御真菌侵染的作用,成为抗真菌病害的研究热点

测定原理:

几丁质酶水解几丁质产生N-乙酰氨基葡萄糖,进一步与对二甲氨基苯甲醛产生红色化合物,在585nm处有特征吸收峰,吸光值增加速率反映了几丁质酶的活性

试剂组成和配制:

产品名称

SH0369-50T/24S

Storage

试剂一:液体

10ml

4℃

试剂二:液体

4ml

4℃

试剂三:液体

50ml

4℃避光

说明书

一份

自备仪器和用品:

天平、水浴锅、离心机、震荡仪、可见分光光度计、1 ml玻璃比色皿,甲苯、蒸馏水

样品处理:

新鲜土样风干,过30-50目筛。

测定操作表:

 

对照管

测定管

土样(g

0.2

0.2

甲苯(μl

30

30

混匀,25℃静置15min

蒸馏水(μl

200

 

试剂一(μl

 

200

混匀,37℃培养24h

蒸馏水(μl

400

400

4000rpm4℃,离心10min,取上清300μl于新的EP管中

试剂二(μl

30

30

混匀,沸水浴5min

试剂三(μl

900

900

混匀,37℃显色20min,取1ml1ml玻璃比色皿中,蒸馏水调零,测定585nm处吸光值,记为A对照管和A测定管,ΔA=A测定管-A对照管

计算公式

标准曲线:y=5.2714x-0.0007R2=0.9989x为标准品浓度(mg/ml),y为吸光值ΔA

酶活性定义:37℃条件下,每克土壤每天分解几丁质产生1μg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量为一个酶活性单位。

土壤几丁质酶活性(μg/d/g 土样)=ΔA +0.0007÷5.2714×V反总÷W÷T×1000= 598×ΔA +0.0007

V反总:反应体系总体积,0.63mlW:样本质量,0.2gT:反应时间,1d10001mg/ml=1000μg/ml

注意事项:

试剂一充分混匀后再使用。