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土壤外切-β-1,4-葡聚糖酶(S-C1)检测试剂盒(分光光度法50T/24S)

货号 SH0343 售价(元) 840
规格 50T/24S CAS号
  • 产品简介
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货号

名称

规格

SH0343

土壤外切-β-1,4-葡聚糖酶(S-C1)检测试剂盒(分光光度法50T/24S)

50管/24样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义:

C1EC3.2.1.91)存在于细菌、真菌和动物体内,是纤维素酶系的组份之一,C1催化多聚糖链的末端非还原端释放出纤维二糖和葡萄糖。

测定原理:

采用3,5-二硝基水杨酸法测定C1催化微晶纤维素降解产生的还原糖的含量。

试剂的组成和配制:

产品名称

SH0343-50T/24S

Storage

提取液:液体

50ml

4℃

试剂一:液体

15ml

4℃

试剂二:液体

60ml

4℃

说明书

一份

自备仪器和用品:

可见分光光度计、水浴锅、离心机、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

样品测定的准备:

称取约0.1g新鲜土样或风干土样,加入1ml提取液,进行冰浴匀浆,室温振荡提取30min,然后10000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

测定步骤:

1、分光光度计预热30min以上,调节波长至540nm,蒸馏水调零。

2、加样表(在EP管中依次加入下列试剂)

试剂名称(μl

测定管

对照管

  样本

50

50

试剂一

500

 

蒸馏水

 

500

混匀,37℃准确水浴2h

试剂二

1000

1000

混匀, 90℃水浴10min(盖紧,防止水分散失),冷却后,540nm下吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管需设一个对照管。

S-C1活性计算

标准条件下测定回归方程为y = 6.4078x - 0.0673x为标准品浓度(mg/ml),y为吸光值。

单位的定义:每g土样每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。

S-C1活力(μg /min /g鲜重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V反总]÷(W× V÷V样总) ÷T=14.305×(ΔA+0.0673) ÷W

10001mg/ml=1000ug/mlV反总:反应体系总体积,0.55mlV样:加入样本体积,0.05 mlV样总:加入提取液体积,1 mlT:反应时间,120 minW:样本质量,g