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土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)检测试剂盒(50T/24S)

货号 SH0339 售价(元) 840
规格 50T/24S CAS号
  • 产品简介
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货号

名称

规格

SH0339

土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)检测试剂盒(分光光度法50T/24S)

50管/24样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义:

S-NAG是溶酶体中的一种酸性水解酶,由土壤微生物分泌。S-NAG活性变化与机体某些病理状态密切相关。

测定原理:

S-NAG分解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算NAG活性。

试剂组成和配制:

产品名称

SH0339-50T/24S

Storage

试剂一:甲苯

5ml(自备)

4℃

试剂二:粉剂

2

-20

试剂三:液体

25ml

4℃

试剂:液体

50ml

4℃

说明书

一份

试剂二:粉剂×2瓶,-20℃保存;临用前每瓶加入6ml蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂仍-20℃保存。

自备仪器和用品:

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。

样品处理:

新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。

测定步骤:

试剂名称

测定管

对照管

风干土样(g

0.05

0.05

试剂一(μl

25

25

 

室温振荡混匀15min

90℃振荡混匀15min

试剂二(μl

400

 

蒸馏水(μl

 

400

试剂三(μl

500

500

混匀, 37℃振荡反应1h后,立即90℃水浴5min(盖紧,防止水分散失),流水冷却10000g 25℃离心10min,取上清液。

上清液μl

500

500

试剂四μl

1000

1000

充分混匀,室温静置2min后,400nm处蒸馏水调零,测定吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。

S-NAG活力计算

标准条件下测定的回归方程为y = 0.00645x -0.0054x为标准品浓度(μmol/L),y为吸光值。

单位的定义:每天每g土样中产生1 μmol-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

S-NAG活力(μmol/d/g 土样)= (ΔA+0.0054) ÷0.00645×V反总÷W÷T =68.84×(ΔA+0.0054)

T:反应时间,1h=1/24dV反总:反应体系总体积:9.25×10-4 LW:样本质量,0.05g