

土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)检测试剂盒(50T/24S)
货号 | SH0339 | 售价(元) | 840 |
规格 | 50T/24S | CAS号 |
- 产品简介
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货号 |
名称 |
规格 |
SH0339 |
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)检测试剂盒(分光光度法50T/24S) |
50管/24样 |
测定意义:
S-NAG是溶酶体中的一种酸性水解酶,由土壤微生物分泌。S-NAG活性变化与机体某些病理状态密切相关。
测定原理:
S-NAG分解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算NAG活性。
试剂组成和配制:
产品名称 |
SH0339-50T/24S |
Storage |
试剂一:甲苯 |
5ml(自备) |
4℃ |
试剂二:粉剂 |
2瓶 |
-20℃ |
试剂三:液体 |
25ml |
4℃ |
试剂四:液体 |
50ml |
4℃ |
说明书 |
一份 |
试剂二:粉剂×2瓶,-20℃保存;临用前每瓶加入6ml蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂仍-20℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
样品处理:
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。
测定步骤:
试剂名称 |
测定管 |
对照管 |
风干土样(g) |
0.05 |
0.05 |
试剂一(μl) |
25 |
25 |
|
室温振荡混匀15min |
90℃振荡混匀15min |
试剂二(μl) |
400 |
|
蒸馏水(μl) |
|
400 |
试剂三(μl) |
500 |
500 |
混匀, 37℃振荡反应1h后,立即90℃水浴5min(盖紧,防止水分散失),流水冷却10000g 25℃离心10min,取上清液。
上清液(μl) |
500 |
500 |
试剂四(μl) |
1000 |
1000 |
充分混匀,室温静置2min后,400nm处蒸馏水调零,测定吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。
S-NAG活力计算:
标准条件下测定的回归方程为y = 0.00645x -0.0054;x为标准品浓度(μmol/L),y为吸光值。
单位的定义:每天每g土样中产生1 μmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-NAG活力(μmol/d/g 土样)= (ΔA+0.0054) ÷0.00645×V反总÷W÷T =68.84×(ΔA+0.0054)
T:反应时间,1h=1/24d; V反总:反应体系总体积:9.25×10-4 L;W:样本质量,0.05g。