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土壤α-葡萄糖苷酶(S-α-GC)检测试剂盒(100T/48S)

货号 SH0335 售价(元) 1260
规格 100T/48S CAS号
  • 产品简介
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货号

名称

规格

SH0335

土壤α-葡萄糖苷酶(S-α-GC)检测试剂盒(微量法100T/48S)

100管/48样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义:

S-α-GC能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖,是纤维素分解酶系中重要组成成分之一,在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。

测定原理:

S-α-GC能够催化对-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有特征光吸收。

试剂组成和配制:

产品名称

SH0335-100T/48S

Storage

试剂一:甲苯

5ml(自备)

4℃

试剂二:粉剂

1

-20

试剂三:液体

20ml

4℃

试剂液体

15ml

4℃

说明书

一份

试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入10ml蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂仍-20℃保存。

自备仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。

样品处理:

新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。

测定步骤:

1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至400nm,蒸馏水调零。

2、加样表

试剂名称

测定管

对照管

风干土样(g

0.02

0.02

试剂一(μl

10

10

 

室温振荡混匀15min

90℃振荡混匀15min

试剂二(μl

130

 

蒸馏水

 

130

试剂三(μl

160

160

混匀, 37℃振荡反应1h后,90℃水浴5min(盖紧,防止水分散失),流水冷却,

10000g 25℃离心10min,取上清液(在EP管或96孔板中加入下列试剂);

上清液μl

70

70

试剂四μl

130

130

充分混匀,室温静置2min后, 400nm处测定吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。

S-α-GC活力计算

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为y = 0.0032x -0.0027x为标准品浓度(μmol/L),y为吸光值。

单位的定义:每天每g土样中产生1 μmol-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

S-α-GC活力(μmol/d/g 土样)= (ΔA+0.0027) ÷0.0032×V反总÷W÷T =112.5×(ΔA+0.0027)

T:反应时间,1h=1/24dV反总:反应体系总体积:3×10-4 LW:样本质量,0.02g

b.96孔板测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为y = 0.0016x -0.0027x为标准品浓度(μmol/L),y为吸光值。

单位的定义:每天每g土样中产生1 μmol-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

S-α-GC活力(μmol/d /g 土样)= (ΔA+0.0027) ÷0.0016×V反总÷W÷T =225×(ΔA+0.0027)

T:反应时间,1h=1/24dV反总:反应体系总体积:3×10-4 LW:样本质量,0.02g