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土壤蔗糖酶(S-SC)检测试剂盒(微量法 100T/48S)

货号 SH0323 售价(元) 1080
规格 100T/48S CAS号
  • 产品简介
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货号

名称

规格

SH0323

土壤蔗糖酶(S-SC)检测试剂盒(微量法 100T/48S)

100管/48样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义:

S-SC能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收,其酶促作用产物与土壤中有机质、氮、磷含量,微生物数量及土壤呼吸强度密切关,是评价土壤肥力的重要指标。

测定原理:

S-SC催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范围内510nm光吸收增加速率与S-SC活性成正比

组成:

产品名称

SH0323-100T/48S

Storage

试剂一:甲苯

1ml(自备)

4℃

试剂二:液体

7.5ml

4℃

试剂三:粉剂

1

4℃

试剂液体

22ml

4℃

说明书

一份

试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前每瓶加入22ml蒸馏水充分溶解备用;用不完的试剂4℃保存;存一周;

自备仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。

样品处理:

新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。

测定步骤和加样表:

试剂名称

测定管

对照管

风干土样(g

0.03

0.03

试剂一(μl

5

5

振荡混匀,使土样全部湿润,37℃水浴15min

试剂二μl

75

75

试剂三μl

220

 

蒸馏水μl

 

220

充分混匀,放入37℃水浴培养24小时,10000 g4℃,离心5min,取上清液

上清液(μl     

85

85

试剂四(μl

215

215

充分混匀,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失),流水冷却,蒸馏水稀释10倍(可以吸取100μl,加入900μl蒸馏水稀释;若吸光度大于4,可以加大稀释倍数),取200uL至微量石英比色皿或96孔板中510nm处读吸光值A。计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管需设一个对照管。

S-SC活性计算

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为y = 4.9x -0.062x为标准品浓度(mg/ml),y为吸光值。

单位的定义:每天每g土样中产生1mg 还原糖定义为一个S-SC活力单位。

S-SC活力(mg/d/g 土样)=( ΔA+0.062) ÷4.9×10×V反总÷W÷T =20.4×(ΔA+0.062)

10:稀释倍数;T:反应时间,1dV反总:反应体系总体积:0.3mlW:样本质量,0.03g

b.96孔板测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为y = 2.45x -0.062x为标准品浓度(mg/ml),y为吸光值。

单位的定义:每天每g土样中产生1mg 还原糖定义为一个S-SC活力单位。

S-SC活力(mg/d/g 土样)=( ΔA+0.062) ÷2.45×10×V反总÷W÷T =40.8×(ΔA+0.062)

10:稀释倍数;T:反应时间,1dV反总:反应体系总体积:0.3mlW:样品质量,0.03g