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土壤过氧化氢酶检测试剂盒(微量法100T/48S)

货号 SH0315 售价(元) 1020
规格 100T/48S CAS号
  • 产品简介
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货号

名称

规格

SH0315

土壤过氧化氢酶(Solid-Catalase,S-CAT)试剂盒(微量法100T/48S)

100管/48样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义:

S-CAT是土壤微生物代谢的重要酶类,在H2O2清除系统中具有重要作用。

测定原理:

H2O2240nm下有特征吸收峰,通过测定与土壤反应后溶液在此波长下吸光度的变化,即可反应S-CAT活性的高低。

试剂组成和配制:

产品名称

SH0315-100T/48S

Storage

试剂一:液体

300μl

4℃

试剂二:粉剂

1

4℃

试剂三:液体

3ml

4℃

说明书

一份

试剂一:液体300μl×1瓶,4℃保存;临用前加入29.7ml蒸馏水充分溶解后待用;用不完的试剂4℃保存;

试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入1ml蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存(如出现结晶析出,60℃-90℃水浴溶解后使用)。

自备仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板(UV板)和蒸馏水

样品处理:

新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。

测定步骤:

1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至240nm,蒸馏水调零。

2、测定前务必准备96UV板一块(UV板不是普通酶标板,普通酶标板只能透过可见光,不能透过紫外光,检测波长小于340nm务必使用UV板)。

3加样表。

试剂名称

测定管

无基质管

风干土样(g

0.03

0.03

试剂一(μl

260

 

蒸馏水(μl

 

260

25℃振荡培养 20min

试剂二(μl

10

10

混匀8000g25℃离心5min,取180uL上清

试剂三(μl

20

20

混匀, 240nm处记录各管吸光值A

注意事项

每个测定管要设一个无基质管,无土管只要做一管。

S-CAT活性计算

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

单位的定义:每天g风干土样催化1μmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。

计算公式:S-CATμmol/d/g)=[(A无土管-A测定管+A无基质管)×V反总÷ε×d×106]÷W÷T=16.5×A无土管-A测定管+A无基质管)

V反总:反应体系总体积,3×10-4 Lε:过氧化氢摩尔消光系数,4.36×104 L / mol /cmd:比色皿光径,1cmT:反应时间,20 min=1/72dW:样本质量,0.03g

b.96孔板测定的计算公式如下

单位的定义:每天g风干土样催化1μmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。

计算公式:S-CATμmol/d/g)=[(A无土管-A测定管+A无基质管)×V反总÷ε×d×106]÷W÷T=33×A无土管-A测定管+A无基质管)

V反总:反应体系总体积,3×10-4 Lε:过氧化氢摩尔消光系数,4.36×104 L / mol /cmd96孔板光径,0.5cmT:反应时间,20 min=1/72dW:样品质量,0.03g