正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义：

S-UE能够水解尿素，产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。

测定原理：

利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH₃-N。

试剂的组成和配制：

试剂二：粉剂×1瓶，临用前加入20ml蒸馏水，充分溶解待用，4℃保存；用不完的试剂4℃保存；

试剂四A液：液体1ml×1瓶，4℃保存；试剂四B液：液体4ml×1瓶，4℃保存；临用前将A液倒入B液中混合，待用；用不完的试剂4℃保存一周。

自备仪器和用品：

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

样品处理：

新鲜土样自然风干或37度烘箱风干，过30~50目筛。

测定步骤：

1、培养

2、将培养结束的上清液稀释10倍（取0.1ml上清液，加入0.9ml蒸馏水）。

3、测氨量：

混匀， 578nm处蒸馏水调零，测A值，ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。

脲酶活力计算：

标准条件下测定的回归方程为y = 0.0915x +0.0373；x为标准品浓度（μg/ml），y为吸光值。

单位的定义：每天每g土样中产生1μg NH₃-N定义为一个酶活力单位。

脲酶活力（μg/d /g 土样）＝(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V反总÷W÷T =874×(ΔA -0.0373)

10：稀释倍数；T：反应时间，1d； V反总：反应体系总体积：2ml；W：样本质量，0.25g。