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总多糖检测试剂盒(分光光度法50T/48S)

货号 SH0204 售价(元) 504
规格 50T/48S CAS号
  • 产品简介
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货号

名称

规格

SH0204

总多糖检测试剂盒(分光光度法50T/48S)

50管/48样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义:

多糖是生物体中广泛存在的物质,是一类由醛糖或酮糖通过糖苷键连接而成的天然高分子多聚物,它是生物体内重要的生物大分子,是维持生命活动正常运转的基本物质之一。

测定原理:

利用水提醇沉法提取总多糖,苯酚-硫酸法测定总多糖含量。

组成:

产品名称

SH0204-50T/48S

Storage

试剂一:液体

12ml

4℃

试剂二:无水乙醇,自备

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试剂三:浓硫酸,自备

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说明书

一份

自备仪器和用品:

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、无水乙醇、浓硫酸、蒸馏水、水浴锅。

总多糖提取: 

样本烘干粉碎,称取约0.05g样本,加入1ml水,充分匀浆。100℃水浴提取2h(必须盖紧盖子防止水分流失),冷却后10000g离心10min,取上清。吸取0.2ml上清,慢慢加入0.8ml无水乙醇,混匀后4℃静置过夜,10000g离心10min,弃上清,沉淀中加入1ml水,充分混匀溶解沉淀。

测定步骤

1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至490nm,蒸馏水调零。

2、 吸取400µl上清,加入200µl试剂一和1ml浓硫酸,混匀后90℃水浴20min,流水冷却。取1ml加入比色皿,于490nm下测定吸光值A

 

总多糖含量计算:

以葡萄糖作为对照品标准条件下测定回归方程为y = 15.962x - 0.0037R2 = 0.9973x为葡萄糖含量(mg/ml),y为吸光值。

总多糖含量(μg/g干重)= (A +0.0037)÷ 15.962×V1÷V2×V3÷W×1000

=313.24×(A+0.0037) ÷W

V1:醇沉后重新溶解后的体积,1mlV2:进行醇沉的体积,0.2mlV3,提取时加入水的体积,1mlW:样本质量,g1000mgμg的换算系数。