正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义：

铜蓝蛋白是血浆的含铜蛋白，有运输铜的功能，同时具有氧化酶的活性，是细胞外液重要的抗氧化剂。

测定原理：

铜蓝蛋白催化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺生成蓝色产物，在645nm处有特征吸收峰，依此可得铜蓝蛋白活性。

组成：

试剂三：液体20ml×1瓶，4℃避光保存。（使用前37℃预热）

自备仪器和用品：

天平、可见分光光度计、1 ml玻璃比色皿和蒸馏水。

测定操作表

1、 血清（浆）等液体样本：直接检测。

2、 动植物组织样本：称取约0.1g组织，加入1ml蒸馏水，进行冰浴匀浆。10000g ，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

计算公式

1、 按体积计算

单位定义：37℃条件下，每分钟每毫升样品与底物作用吸光值升高0.01为一个酶活单位。

Cp活力（U/ml）=×V反总÷V样÷T=33.33×OD₆₄₅

2、 按鲜重计算

单位定义：37℃条件下，每分钟每克样品与底物作用吸光值升高0.01为一个酶活单位。

Cp活力（U/g鲜重）=×V反总÷（W×V样÷V样总）÷T=33.33×OD₆₄₅÷W

3、 按蛋白浓度计算

单位定义：37℃条件下，每分钟每毫克蛋白样品与底物作用吸光值升高0.01为一个酶活单位。

Cp活力（U/mg prot）=×V反总÷（Cpr×V样）÷T=33.33×OD₆₄₅÷Cpr

V样：0.1 ml；V反总：1 ml；T：反应时间，30min；V样总：加入提取液体积，1ml； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；W：样本质量，g

注意事项

试剂二和试剂三有一定的毒性和刺激性，请操作时做好防护措施。