正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义：

类黄酮是一类多苯化合物，属于植物次生代谢物，对人体具有消炎，抗菌，降血脂，清除体内羟自由基，预防癌症等作用。

测定原理：

在碱性亚硝酸盐溶液中，类黄酮与铝离子形成在510nm处有特征吸收峰的红色络合物，测定样品提取液在510nm处的吸光值，即可计算样品类黄酮含量。

组成：

自备仪器和用品：

天平、烘箱、粉碎仪、筛子、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。

类黄酮提取：

将样本烘干至恒重，粉碎，过40目筛之后，称取约0.02g，加入2ml提取液，60℃振荡提取2h，10000g，25℃，离心10min，取上清待测。

测定操作表

1、 分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长至500nm，蒸馏水调零。

2、 操作表

类黄酮含量计算公式

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线：y = 5.02x+0.0007，R² = 0.9996  

类黄酮含量（mg/g 干重）=（ΔA -0.0007）÷5.02÷(W÷V样总)= 0.398×（ΔA -0.0007）÷W

V样总：加入提取液体积，2.5ml； V样：反应中样品体积，0.108ml； W：样品质量，g

b.用96孔板测定的计算公式如下

标准曲线：y = 2.51x+0.0007，R² = 0.9996

类黄酮含量（mg/g 干重）=（ΔA -0.0007）÷2.51÷(W÷V样总)= 0.797×（ΔA -0.0007）÷W

V样总：加入提取液体积，2ml；V样：反应中样品体积，0.108ml；W：样品质量，g

最低检出限为10µg/g。