LbCas12a Lyophilized Powder(8-TUBE STRIPS)
| 货号 | V32108T | 售价（元） | 1320 |
| 规格 | 48T | CAS号 |
- 产品简介
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产品描述
LbCas12a (又名Cpf1)核酸酶来源于Lachnospiraceae bacterium ND2006菌株。LbCas12a是由crRNA介导的DNA核酸内切酶，在靶标双链DNA存在PAM (TTN) 序列的情况下，特异地剪切靶标双链DNA，使DNA双链断裂并生成粘性末端。而LbCas12a特异地剪切单链DNA靶标不依赖PAM序列。此外，双链或单链DNA靶标均能激活LbCas12a的反式剪切活性(即旁路剪切活性/附属剪切活性)，即当LbCas12a酶与crRNA、靶标DNA结合形成三元复合物后，便会被激活针对非特异序列ssDNA的反式剪切活性，将体系中的任意序列ssDNA切碎。因此，LbCas12a酶不仅可用于体外dsDNA的特异剪切，也可用于靶标核酸的快速检测，详见本公司开发的HOLMES[1]核酸快检技术。
本产品将无甘油LbCas12a核酸酶冻干，可用于常温运输及保存，使用配套的冻干Cas酶复溶液复溶后，具有与本公司非冻干型LbCas12a (Cpf1) Nuclease（#32108）同等的反应活性。本产品包括可用于单个反应的酶冻干粉及冻干球等多种冻干形态，满足不同下游反应体系构建的需求。
产品组分
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组分 |
V32108T-01 |
V32108T-02 |
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48 T |
96 T |
· 单个反应的冻干粉中LbCas12a含量为5 pmol，建议用于20 μL CRISPR反应体系；
保存条件
本产品常温保存及运输；复溶后于-20℃储存，避免反复冻融。
实验流程
1.冰上制备如下除Cas酶外的CRISPR反式剪切反应体系 mix：
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组分 |
体积 |
终浓度 |
| 10 × HOLMES Buffer 1（#32005） |
2 μL |
1 × |
| 10 μM crRNA |
0.5 μL |
250 μM |
| 1 μM Target DNA | 0.5 ~ 5 μL |
25 ~ 250 μM |
| 10 μM HOLMES ssDNA Reporter（#31101） | 0.5 μL |
250 μM |
| Nuclease-free Water |
Up to 20 μL |
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2.将上述 mix 20 μL混匀后加入单个反应体系的冻干粉，使之溶解。
3.立即放入实时荧光定量 PCR仪检测荧光信号，37℃反应，每 30 sec采集一次荧光信号。
实验结果
注意事项
2. 为防止 RNase 污染，请保持实验区干净整洁，操作时需穿戴干净的手套、口罩，实验所用枪头、离心管等耗材均为 RNase-free。
3. 本产品仅包含 Cas 酶，CRISPR 反应体系中所需的 Target DNA 和 crRNA 需要自己制备，10 × HOLMES Buffer 1 (#32005)和 10 μM HOLMES ssDNA Reporter (#31101)推荐从 TOLOBIO 选购。
4. 复溶后的 LbCas12a 需在冰上配制反应体系，且使用后立即将酶置于-20℃保存 (-20℃可保存一个月)。
5. 本产品仅供科研使用。