产品信息

       EZ-Tn5™ Transposase* is a hyperactive, muta ted form of Tn5 transposase and a   highly efficient enzyme for insertion of an EZ-Tn5 Trans poson into any target DNA, in vitro.In addition to EZ-Tn5 Transposase, efficient transposition requires that each EZ-Tn5 Transposon have a specific 19-bp transposase recognition se quence (Mosaic End or ME sequence) at each of its ends. Mutations engineered into both the 19-bp MEs and the EZ-Tn5 Transposase results in an in vitro transposition frequency that is 1000-fold greater than wild type.

       EZ-Tn5 Transposase catalyzes a multi-step “cut and paste” transposition reaction. Initially, the enzyme binds the 19-bp ME of   the transposon to form a Transposome™(synaptic complex). The transposome   then randomly attacks and cleaves the phosphodiester backbone of the target   DNA. Finally, the EZ-Tn5 Transposase catalyzes the covalent linkage of the 3′-OH ends of the transposon to the exposed 5′-phos phorylated ends of the target DNA. Transposi tion creates a 9-bp   sequence duplication imme diately flanking the transposon insertion site.

        EZ-Tn5™转座酶是一种高活性，突变形式的Tn5转座酶，是一种在体外将EZ-Tn5转座子插入任何靶标DNA的高效酶。除EZ-Tn5转座酶外，高效的转座还要求每个EZ-Tn5转座子在其每个末端均具有特定的19 bp转座酶识别序列（Mosaic End或ME序列）。工程化到19 bp的ME和EZ-Tn5转座酶中的突变产生的体外转座频率是野生型的1000倍。

        EZ-Tn5转座酶催化一个多步骤的“剪切和粘贴”转座反应。 最初，该酶结合转座子的19 bp ME形成Transposome™（突触复合体）。 然后该转座体随机攻击并切割靶DNA的磷酸二酯主链。 最后，EZ-Tn5转座酶催化转座子的3'-OH末端与目标DNA暴露的5'-磷酸化末端的共价键。 转座可立即形成位于转座子插入位点侧翼的9 bp序列重复。

        组成成分：

                       EZ-Tn5 Transposase：储存在-20°C

                       EZ-Tn5 10X Reaction Buffer：储存在-20°C

                       EZ-Tn5 10X Stop Solution：储存在-20°C

                       Sterile Water：储存在-20°C

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参考文献：

1.   Goryshin, I. Y. and Reznikoff, W. S. (1998) J. Biol. Chem. 273, 7367. 

2.   York, D. et al., (1998) Nucl. Acids Res. 26, 1927.

 技术参数

产品应用- Insert a marker, T7 promoter, or R6Kγ origin of replication flanked by the 19-bp MEs of Lucigen’s EZ-Tn5 standard Transposons into any target DNA.

- Insert any custom DNA sequence flanked by the 19-bp MEs of an EZ-Tn5 Transposon into any target DNA.

- Prepare Transposomes, in the absence of Mg2+, for electroporation into living bacteria and subsequent random insertion of the transposon into the bacterial chromosome.

- 将Lucigen的EZ-Tn5标准转座子的19 bp ME侧翼的标记，T7启动子或R6Kγ复制起点插入任何目标DNA。

- 将EZ-Tn5转座子的19 bp ME侧翼的任何自定义DNA序列插入任何目标DNA。

- 在没有Mg2 +的情况下，准备转座体以电穿孔进入活细菌，然后将转座子随机插入细菌染色体。