X-α-Gal 酵母半乳糖苷酶 (MEL1) 的显色底物——检测GAL4系统的酵母双杂交
货号 | M5831 | 售价(元) | 1280 |
规格 | 100mg | CAS号 | 107021-38-5 |
- 产品简介
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X-α-Gal是一种酵母半乳糖苷酶 (MEL1) 的显色底物,用于在培养基上直接检测GAL4系统的酵母双杂交作用。通过蓝白颜色筛选,快速和简便地识别阳性的蓝色克隆,无需费时的β-半乳糖苷酶报告基因检测。
X-α-Gal检测酵母MEL1基因的激活,MEL1是GAL4酵母双杂交系统的一个报告基因,编码分泌型的α-半乳糖苷酶。该酶可水解无色的X-α-Gal底物并最终产生蓝色产物。表达α-半乳糖苷酶的酵母菌落在含有X-α-Gal的培养基上显蓝色,即阳性的双杂交作用。
产品用途
1)α-半乳糖苷酶的显色底物,形成蓝色沉淀。在培养基上直接检测酵母双杂交相互作用,利用此底物可以省去双杂交体系中的β-半乳糖苷酶溶液和filter-lift assays;
2)用于区分肠杆菌科内的不同菌种以及区分双歧杆菌和乳酸菌;
3)在组织化学中用于酶活性的检测。
运输与保存方法
冰袋运输。-20 ºC保存。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存液的配制及使用
一、涂布于预制平板:
1)溶解24 mg X-α-gal于6 mL DMF,终浓度为4mg/ mL的溶液。
2)涂布200 μL(15 cm) 或者100 μL(10 cm)X-α-gal 储存液于预制平板上;
3)放于37℃培养箱至液体被吸收(由于DMF挥发性低,最长可放4小时);
4) 将转化细菌或酵母涂于平板上,于37℃或30℃培养直至蓝色菌落出现。
二、直接加入琼脂中:
1)溶解60 mg X-α-gal于3 mLDMF,终浓度为20 mg/ mL的溶液。
2)将已灭菌琼脂培养基冷却至50-55 ℃;
3)往已冷却的培养基中直接加入2 mL -10 mL 20 mg/ mL X-α-Gal储存液,混匀,快速倒平板。
携带MEL1基因的酵母菌株:
Y2HGold、Y190、AH190、Y187、PG69-2A
X-Gal与X-α-gal不同:
X-Gal是E.coli β-半乳糖苷酶(LacZ)的反应底物,而X-α-gal是酵母α-半乳糖苷酶(MEL1)的反应底物。X-α-gal用作酵母双杂交系统中蓝白筛选的筛选标记。
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