

Fluo-3, AM, Cell Permeant 钙离子荧光探针
货号 | T5082 | 售价(元) | 5×50μg |
规格 | 5×50μg | CAS号 | 121714-22-5 |
- 产品简介
- 相关产品
货号 |
名称 |
规格 |
价格 |
T5062 |
Fluo-3, AM, Cell Permeant 钙离子荧光探针 |
50μg |
427.5 |
T5082 |
Fluo-3, AM, Cell Permeant 钙离子荧光探针 |
5×50μg |
1805 |
产品介绍
细胞渗透性染料 fluo-3 AM 是一种可被可见光激发、具有高亲和力的 Ca2+ 指示剂Fluo-3广泛地用于流式细胞术和激光共聚焦显微扫描显中。最近以来,在G-蛋白偶联的受体(GPCR)功能性研究中,Fluo-3, AM已经广泛地用于基于细胞的高透射能扫描分析中。Fluo-3本身是非荧光性的,一旦与Ca2+结合产生荧光,荧光的量在Ca2+浓度达到0.14(Kd ~ 390 nM)时达到饱和, Fluo-3 AM 进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成 Fluo-3,从而被滞留在细胞内。Fluo-3 可以和钙离子结合,结合钙离子后可以产生较强的荧光,最大激发波长为 506 nm,最大发射波长为 526 nm。实际检测时推荐使用的激发波长为 488 nm 左右,发射波长为 525-530 nm。。Fluo-3和Fura-2相比,其优点是:一方面可以被氩离子激光(argon-ion laser)的488nm激发光激发,便于检测;另一方面,Fluo-3和钙离子结合后荧光变化更强,即对钙离子浓度变化的检测更加灵敏;同时,Fluo-3和钙离子的结合能力较弱,这样可以比Fura-2检测到细胞内更高浓度的钙离子水平;此外,对于细胞内的钙离子的即时变化反应得更加准确,减小了因为和钙离子解离速度慢而导致的荧光变化滞后。
产品性质
CAS 号(CAS NO.): 121714-22-5
分子式(Molecular Fomular): C51H50Cl2N2O23
分子量(Molecular Weight):1129.8616
Ex/Em (nm):488nm/525nm
纯度(Purity):≥98%
外观(Appearance):粉末
使用说明:
流式操作的推荐步骤:
1、收集细胞,重悬到 106 个细胞。
2、(可选步骤)加入丙磺舒,使终浓度达到 1-2.5 mM 或苯磺唑酮,终浓度为 0.1–0.25 mM。(丙磺舒可提高细胞染色效率,减少 Fluo-3 AM 外漏)。
3、加入 Fluo-3 AM,使终浓度为 0.5-5 μM(具体浓度需要自己优化),20-37℃ 孵育 15-60 分钟。
4、用细胞染色缓冲液洗涤细胞三次,加入 500 ul 染色缓冲液,37℃ 条件下孵育 20-30 min,确保 Fluo-3 AM 在细胞内完全转变成 Fluo-3。但需注意此时如放 37℃ 时间较长会增加 fluo3 从细胞的流失。
5、Fluo-3 AM 的激发波长为 488 nm,发射波长为 525 nm。
正对照的设置:
关于正对照,经典使用 ionomycin 刺激淋巴细胞作为正对照,刺激浓度为 1-2ug/ml。
注意事项:
1)建议您在正式实验前先摸索一下细胞量、钙离子荧光探针的终浓度、培养时间等,找到最佳实验条件。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3)保存条件:RT
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货号 |
名称 |
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