产品信息

产品简介

超快转膜液使用独特配方，能高效超快地将蛋白转移到印迹膜（PVDF或硝纤膜）上。湿转法（Tank blot）或半干转法（Semi-dry blot）都可以使用。

产品特点：

快速高效：分子量100kD以下蛋白只需转膜30-40分钟。与传统转膜液相比，发热量更低。
兼容性好：超快转膜液能兼容LaemmLi胶，预制胶，Bis-Tris胶等多种凝胶。
转移效率高：超快转膜液对分子量跨度较大的蛋白也有很好的转移效率，有效的解决了大小蛋白不能在同一张膜上同时转移的问题。

使用说明

转膜前准备：5-6张裁好的滤纸：裁好的转印膜；足够的1×超快转移buffer。

一、湿转法（Tank blot）

1、配制1×超快转膜液

1升1×Western超快转膜液：取50ml 20×超快转膜液，加入750ml双蒸水，混匀后加入200ml甲醇，混匀即可，现配现用，配好后置于冰上存放）。

2、将滤纸和海绵浸泡在1×超快转膜液中，完全浸湿。

3、将凝胶在超纯水中浸泡漂洗2分钟，去除胶表面的SDS；随后将凝胶浸泡在1×超快转膜液中（注意：在使用6%或8%分离胶转移大分子蛋白时，应该降低甲醇含量至10%，以获得更好转移效果）。

注意：1、要彻底清除三明治结构中的气泡，适当补加1×超快转膜液保持三明治结构湿润。

2、PVDF膜使用前要用无水甲醇润湿30秒。

3、三明治结构的制作不能太紧，也不能太松。太紧和太松都会影响转印效果。如果太紧的话，可以去除阳极一侧的海绵或滤纸。

5、将三明治结构放于转移槽中。

  1、按照下表配制1×超快转膜液

2、将滤纸浸泡在1×超快转膜液中，完全浸湿。

3、将凝胶在超纯水中浸泡漂洗2分钟，去除胶表面的SDS；随后将凝胶浸泡在1×超快

转膜液中。

注意：水中漂洗时间一定不能超过2分钟，否则分子量较大的蛋白不能完全转移。

半干转时，滤纸、胶、膜之间的大小，一般是下层滤纸≥膜≥胶≥上层滤纸。上下两层的滤纸一定不能接触；滤纸、胶、膜之间千万不能有气泡。接触的滤纸和气泡会造成短路。

注意：PVDF膜使用前需用无水甲醇润湿30秒。

三、转移条件

1、湿转

 推荐使用恒流转移，电流可设置350-400mA，转膜液中离子成分较多，可以承受大电流，并且发热量较低。

注：不推荐使用恒压转移，因转膜液中离子成分较多，当电压在100v左右时，电流会达到400mA，此时已达到普通电泳仪器zui大电流，随着时间延长，可能无法达到稳定的100v电压。

2、半干转

保存：常温保存，有效期两年。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。