Phalloidin-iFluor™ 532 Conjugate鬼笔环肽-iFluor™ 532
| 货号 | LX7801 | 售价（元） | 2006.4 |
| 规格 | 300T | CAS号 |
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产品信息
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货号 |
名称 |
规格 |
价格/元 |
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LX7801 |
Phalloidin-iFluor™ 532 Conjugate鬼笔环肽-iFluor™ 532 |
300T |
2006.4 |
产品简介
鬼笔环肽（Phalloidin）的结合阻止丝状肌动蛋白（微丝）的解离，稳定微丝结构，从而破坏微丝的聚合-去聚合的动态平衡。此特性使得肌动蛋白聚合发生的临界浓度（CC）降至＜1µg/mL，因此，可用作一种聚合促进剂。此外，鬼笔环肽还可抑制F-actin的ATP水解活性。
本品为鬼笔环肽-iFluor 532标记探针会选择性地结合F-肌动蛋白。以纳摩尔浓度使用，鬼笔环肽衍生物是方便的探针，用于标记，鉴定和定量甲醛固定和透化组织切片中的F-肌动蛋白，细胞培养物或无细胞实验。肌动蛋白是一种球状的，大约42kDa的蛋白质，几乎存在于所有真核细胞中。 它也是最高度保守的蛋白质之一，与藻类和人类不同的物种相差不超过20％。 肌动蛋白是细胞中两种细丝的单体亚基：微丝，细胞骨架的三个主要组分之一，以及微丝，是肌细胞中收缩装置的一部分。 因此，肌动蛋白参与许多重要的细胞过程，包括肌肉收缩，细胞运动，细胞分裂和胞质分裂，囊泡和细胞器运动，细胞信号传导，以及细胞连接和细胞形状的建立和维持，鬼笔环肽-iFluor 514标记探针是多色成像应用提供的一种荧光鬼笔环肽衍生物。
Warbio生物以1000×储存液形式（溶于DMSO）提供，按照100µl/孔（96孔板），总共可做300T。
注意事项：
鬼笔环肽 的分子量小，很容易通过细胞，不需要对细胞进行冷丙酮和TRITON X-100处理。毒性较大，戴上手套操作。
有几种方法都能用来染色组织细胞培养物内的肌动蛋白丝（F-actin）染色，其中，固定步骤在获得可信且具代表性的细胞F-actin分布情况中至关重要。固定步骤基于实验自身需求来选择。多聚甲醛或戊二醛都能得到优秀的F-actin染色和良好的板状伪足维持保存。
操作步骤
1.制备1X鬼笔环肽缀合物工作溶液：加入1μL1000X鬼笔环肽结合物DMSO溶液至1mL含1％BSA的PBS中。
注意1：鬼笔环肽缀合物未使用的1000X DMSO储备溶液应等分并储存在-20℃，避光。
注意2：不同的细胞类型可能染色不同。鬼笔环肽缀合物工作溶液的浓度的制备需要根据实际而定。
2.染色细胞：
2.1执行甲醛固定，在室温下将含3.0-4.0％甲醛的细胞在PBS中孵育10-30分钟。
注意：避免使用任何含甲醇的固定剂，因为甲醇会在固定过程中破坏肌动蛋白。 优选的固定剂是不含甲醇的甲醛。
2.2用PBS冲洗固定细胞2-3次。
2.3可选：在PBS中加入0.1％Triton X-100固定细胞3至5分钟，以增加渗透性。 用PBS冲洗细胞2-3次。
2.4将100μL/孔（96孔板）鬼笔环肽缀合物工作溶液加入固定的细胞中，并在室温下染色细胞20至90分钟。
2.5在加上盖玻片之前，用PBS轻轻冲洗细胞2至3次以除去过量的鬼笔环肽缀合物，然后在显微镜下进行，密封和成像。
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