产品简介：

台盼蓝（Trypan Blue，CAS NO. 72-57-1）是一种蓝色酸性染料，含有两个偶氮发色团。是一种较大、亲水和四磺酸化的阴离子染料，普遍用于检测细胞膜的完整性以及评估细胞的存活率。作为一种鉴定细胞存活的简易方法，台盼蓝渗透进入丧失活性或细胞膜不完整的细胞将其染成蓝色（通常认为细胞膜完整性丧失，即可认为细胞已经死亡），而具有完整细胞膜的活细胞将染料排斥在外。因此，台盼蓝染色后，通过显微镜下观察颜色的差异即可肉眼区分死细胞和活细胞，通过计数就可对细胞存活率进行比较精确的计算。

台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒（Trypan Blue Staining Cell Viability Assay Kit）是一款简易的细胞存活率检测试剂盒，含实验所需的台盼蓝染色液和细胞重悬液，操作单快捷。

试剂盒组分 

组分 A: Cell Suspension Buffer 细胞重悬液       100ml

组分 B: 2×Trypan Blue Stain 2×台盼蓝染色液   10ml

使用方法

1.自备材料

1.1胰蛋白酶消化液

1.2血球计数板

1.3光学显微镜

2.细胞收集

对于悬浮细胞：1000~2000×g离心收集细胞，充分清洗后，弃上清，加入适量或1ml细胞重悬液将细胞沉淀重悬，制备成单细胞悬浮液。若有需要，可做适当稀释。

对于贴壁细胞：先用胰酶消化细胞，之后1000~2000×g离心收集细胞，充分清洗后，弃上清，加入适量或1ml细胞重悬液将细胞沉淀重悬，制备成单细胞悬浮液。若有需要，可做适当稀释。

3.台盼蓝染色

吸取100μl单细胞悬液到1.5ml离心管，加入100μl 2×台盼蓝染色液，轻轻混匀，室温染色3min。

【注意】：一般情况染色3min足矣。某些情况可延长染色时间，但不宜超过10min。

4.细胞计数

吸取少量染色细胞到血球计数板内，于普通光镜10×物镜下计数四个大格内的细胞数，压线者数上不数下，数左不数右，分别记录着色细胞（包括损伤细胞和死细胞）和未着色细胞（活细胞）。

【注意】：用移液枪加样，沿着盖玻片的边缘轻轻加液使其完全覆盖住整个小室。不宜过量或量太少。

【注意】：每个细胞样品至少需数500个细胞，数出蓝色细胞和细胞总数。

细胞存活率计算公式如下：

细胞存活率（活细胞率）：Viability（%）=（总细胞数目-总着色细胞数）/总细胞数× 100

【注意】：处于健康的对数生长期细胞，通常情况活细胞至少占到95%。

保存与运输方法

保存：2-8℃保存，1年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

台盼蓝具有轻微的细胞毒性，操作过程中请注意防护，避免与身体的直接接触

凋亡小体偶尔也有台盼蓝拒染现象。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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