产品信息

        沃博生物的鼠尾I型胶原蛋白（Collagenfromrattail,TypeI）系采用Birkedal-Hansen方法在无菌下制备，纯度达到95%以上，可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于细胞培养皿的包被，特别适合普通细胞培养器皿不易贴壁细胞的培养；也可用于制备三维胶原凝胶，使细胞在模拟的三维环境中生长。

产品性质

中文别名：鼠尾胶原蛋白Ⅰ型

英文别名：Rat tail tendon collagen type

外观（Appearance）：白色粉末

溶解性（Solubility）：溶解于0.006mol/L乙酸 5mg/ml

优势特点

无尘车间内生产，保证洁净度

可用于包被细胞培养器皿(单分子层包被)

也可形成具有一定强度的三维胶用于细胞的三维空间培养

通过细胞培养测试(包括三维胶内的细胞培养)

电泳结果和 Sigma 的同类产品无显著区别

产品为无菌的溶液，省去从干粉配制的麻烦

图示案例

图1：沃博生物的鼠尾胶原蛋白包被的

培养皿中生长的 PC-12 细胞

图2：沃博生物的鼠尾胶原蛋白三维胶中

生长的 NIH-3T3 细胞（接种后 5天）

图3：Sigma鼠尾胶原蛋白(货号： C7661)

SDS-PAGE 电泳对比。

A: Sigma B：warbio

实验步骤参考

1、细胞培养器皿的表面包被 推荐浓度： 1-5ug/cm2

以包被浓度为 2 ug/cm2 为例

用无菌0.006mol/L(0.36g/L) 乙酸将胶原蛋白稀释到0.012mg/ml。按表 (一)体积加到相应的培养器皿中

确保胶原蛋白溶液铺满器皿的表面，开盖在超净台上过夜晾干。 也可以在室温放置 1小时后，用PBS洗3-4次后直接使用。

按表 (一)体积加到相应的培养器皿中：

包被好的器皿在 4-25℃至少可保存3个月以上的时间。

2、三维胶原的制备

沃博生物的鼠尾胶原蛋白I型在浓度1mg/ml以上，pH 7左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度1-2mg/ml。沃博胶原蛋白溶解于0.006mol/L 乙酸中，在成胶过程中需要加入0.06X 体积的 0.1mol/L NaOH 来中和。

需要的溶液 ( 均需要 无菌 、 预冷 ): 10xPBS( 可含10 mg/L的酚红用于 pH 指示 )或 10x 培养液 , 0.1mol/L NaOH, 0.1mol/L 乙酸(一般不用), 双蒸水

A．不含细胞的三维胶原的制备（以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例）：将200ul沃博生物鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中，加入 690ul H2O。然后加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反过来把12ul 0.1mol/L NaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入100ul 10xPBS或10x培养液，混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。将培养器皿在室温(25度左右)下放置20分钟待胶凝固后，转移到培养箱内。如果配制中使用的是10xPBS，使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。

B．含细胞的三维胶原的制备（以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例）：准备好悬浮于培养液的细胞，并放置于冰浴中。将200ul沃博生物鼠尾胶原蛋白I型 (5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反过来把12ul 0.1mol/L NaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入23ul 10xPBS或10x培养液，混匀(混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。加入760ul的细胞悬浮液，混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温下放置20分钟待胶凝固后，加入适当体积的细胞培养液，转移到培养箱中培养。

注：鼠尾胶原蛋白I型在室温下pH中性时可迅速成胶，在操作过程中要尽量保持低温。

1 、 Birkedal-Hansen, H. 1987. Catabolism and turnover of collagens: Collagenases. Methods Enzymol. 144 : 140-171.

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注意事项

1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2、鼠尾胶原蛋白I型在室温下pH中性时可迅速成胶，在操作过程中要尽量保持低温。

3 、整个操作请在无菌环境下无菌操作，避免污染以影响细胞生长。

运输与保存方法

冰袋运输。4℃保存，有效期1年。不可冻存。