产品信息

产品描述

X-α-Gal（5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷，CAS：107021-38-5），一种用来检测α-半乳糖苷酶（也称为蜜二糖酶，α-D-半乳糖苷半乳糖水解酶，EC 3.2.1.22）活性的显色底物。X-α-Gal的使用，避开双杂交分析中β-半乳糖苷酶溶液制备和滤膜提升实验（filter-lift assay）的繁琐操作，只需直接添加在培养基上，通过蓝色沉淀的生成与否，即可用来检测双杂交相互作用。X-α-Gal可用来区分肠杆菌科内的不同物种以及划分乳酸菌和双歧杆菌。组织学研究中，X-α-Gal还可借助光学显微镜来检测组织的α-半乳糖苷酶活性。

X-α-Gal检测酵母MEL1基因的激活，MEL1是GAL4酵母双杂交系统的一个报告基因，编码分泌型的α-半乳糖苷酶。该酶可水解无色的X-α-Gal底物并最终产生蓝色产物。表达α-半乳糖苷酶的酵母菌落在含有X-α-Gal的培养基上显蓝色，即阳性的双杂交作用。

产品性质：

1）CAS NO：107021-38-5

2）化学名：5-Bromo-4-chloro-3-indoxyl-α-D-galactopyranoside 5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷；X-α-D-Galactoside X-α-D-半乳糖苷；

3）分子式：C14H15BrClNO6

4）分子量：408.64g/mol

5）纯度：≥98%（TLC）

6）外观：白色或近白色结晶粉末

产品用途

1）α-半乳糖苷酶的显色底物，形成蓝色沉淀。在培养基上直接检测酵母双杂交相互作用，利用此底物可以省去双杂交体系中的β-半乳糖苷酶溶液和filter-lift assays；

2）用于区分肠杆菌科内的不同菌种以及区分双歧杆菌和乳酸菌；

3）在组织化学中用于酶活性的检测。

运输与保存方法

冰袋运输。-20 ºC保存。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存液的配制及使用

一、涂布于预制平板：

1）溶解24 mg X-α-gal于6 mL DMF，终浓度为4mg/ mL的溶液。

2）涂布200 μL(15 cm) 或者100 μL（10 cm）X-α-gal 储存液于预制平板上；

3）放于37℃培养箱至液体被吸收（由于DMF挥发性低，最长可放4小时）；

4） 将转化细菌或酵母涂于平板上，于37℃或30℃培养直至蓝色菌落出现。

二、直接加入琼脂中：

1）溶解60 mg X-α-gal于3 mLDMF，终浓度为20 mg/ mL的溶液。

2）将已灭菌琼脂培养基冷却至50-55 ℃；

3）往已冷却的培养基中直接加入2 mL -10 mL 20 mg/ mL X-α-Gal储存液，混匀，快速倒平板。

携带MEL1基因的酵母菌株：

    Y2HGold、Y190、AH190、Y187、PG69-2A

X-Gal与X-α-gal不同：

    X-Gal是E.coli β-半乳糖苷酶（LacZ）的反应底物，而X-α-gal是酵母α-半乳糖苷酶（MEL1）的反应底物。X-α-gal用作酵母双杂交系统中蓝白筛选的筛选标记。

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