Fluo-3, AM, Cell Permeant 钙离子荧光探针
| 货号 | T5082 | 售价（元） | 5×50μg |
| 规格 | 5×50μg | CAS号 | 121714-22-5 |
- 产品简介
- 相关产品
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货号 |
名称 |
规格 |
价格 |
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T5062 |
Fluo-3, AM, Cell Permeant 钙离子荧光探针 |
50μg |
427.5 |
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T5082 |
Fluo-3, AM, Cell Permeant 钙离子荧光探针 |
5×50μg |
1805 |
产品介绍
细胞渗透性染料 fluo-3 AM 是一种可被可见光激发、具有高亲和力的 Ca2+ 指示剂Fluo-3广泛地用于流式细胞术和激光共聚焦显微扫描显中。最近以来，在G-蛋白偶联的受体（GPCR）功能性研究中，Fluo-3, AM已经广泛地用于基于细胞的高透射能扫描分析中。Fluo-3本身是非荧光性的，一旦与Ca2+结合产生荧光，荧光的量在Ca2+浓度达到0.14(Kd ～ 390 nM)时达到饱和, Fluo-3 AM 进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成 Fluo-3，从而被滞留在细胞内。Fluo-3 可以和钙离子结合，结合钙离子后可以产生较强的荧光，最大激发波长为 506 nm，最大发射波长为 526 nm。实际检测时推荐使用的激发波长为 488 nm 左右，发射波长为 525-530 nm。。Fluo-3和Fura-2相比，其优点是：一方面可以被氩离子激光(argon-ion laser)的488nm激发光激发，便于检测；另一方面，Fluo-3和钙离子结合后荧光变化更强，即对钙离子浓度变化的检测更加灵敏；同时，Fluo-3和钙离子的结合能力较弱，这样可以比Fura-2检测到细胞内更高浓度的钙离子水平；此外，对于细胞内的钙离子的即时变化反应得更加准确，减小了因为和钙离子解离速度慢而导致的荧光变化滞后。
产品性质
CAS 号（CAS NO.）: 121714-22-5
分子式（Molecular Fomular）: C51H50Cl2N2O23
分子量（Molecular Weight）：1129.8616
Ex/Em (nm)：488nm/525nm
纯度（Purity）：≥98%
外观（Appearance）:粉末
使用说明：
流式操作的推荐步骤：
1、收集细胞，重悬到 106 个细胞。
2、（可选步骤）加入丙磺舒，使终浓度达到 1-2.5 mM 或苯磺唑酮，终浓度为 0.1–0.25 mM。（丙磺舒可提高细胞染色效率，减少 Fluo-3 AM 外漏）。
3、加入 Fluo-3 AM，使终浓度为 0.5-5 μM（具体浓度需要自己优化），20-37℃ 孵育 15-60 分钟。
4、用细胞染色缓冲液洗涤细胞三次，加入 500 ul 染色缓冲液，37℃ 条件下孵育 20-30 min，确保 Fluo-3 AM 在细胞内完全转变成 Fluo-3。但需注意此时如放 37℃ 时间较长会增加 fluo3 从细胞的流失。
5、Fluo-3 AM 的激发波长为 488 nm，发射波长为 525 nm。
正对照的设置：
关于正对照，经典使用 ionomycin 刺激淋巴细胞作为正对照，刺激浓度为 1-2ug／ml。
注意事项：
1）建议您在正式实验前先摸索一下细胞量、钙离子荧光探针的终浓度、培养时间等，找到最佳实验条件。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3）保存条件：RT
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货号 |
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