Animal for ONT SMRT RNA-Seq Library Constion Kit

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货号	SN0031S	售价	5980
规格	5T	CAS号

产品简介
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产品简介

随着ONT的技术发展。每个分子实验室都可以轻易获取一台nanopore的MiniON.nanopor推动了第三代测测的DIY时代。每个分子实验室都可以根据自己的需要进行个性化的三代测序。为了满足这种个性化需求。Tiosbio推出了SUPERSWITCH^®

三代转录组建库试剂盒。SUPERSWITCH™第三代测序转录组文库构建试剂盒提供了一种基于PCR方式从纳克级总RNA合成高质量cDNA的方法。SUPERSWITCH™第三代测序转录组文库构建试剂盒cDNA合成技术是基于RNA转录5’末端跳转机制 (Switching Mechanism at 5′ End of RNA Template，SMART) 技术。SMART技术非常适合起始样品量有限的材料，能够以2 ng总RNA（或极低浓度样本）合成的高质量cDNA，用于杂交探针、”Virtual Northern” blots、cDNA测序及其他应用。

本试剂盒的5’和3’采用不同的接头引物，在原始数据上就能直接判读resds的来源是mRNA还是cDNA。

本试剂盒采用SUPERSWITCH^®
技术，生成高质量的双链cDNA。满足nanopore的上机要求。

本试剂盒的建库产物，280/260值大于1.9.230/260值大于1.8，nanodrop/Qbuti比值小于2.满足nanopore转录组苛刻的上机要求质量。是数据稳定产出的基本保障。

本试剂盒的模板为样本的总RNA,最大限度的反应了样本的转录组的均一性。

本试剂盒最终的产物，都为15个循环的扩增产物。为今后的nanopore的reads定量打下了坚实的基

试剂盒组分：

试剂盒1

目的	试剂		PacBio		Nanopore
			SP0021		SN0021
			M/10次	L/20次	M/10次	L/20次
反转录	1	●SUPERSWITCH™ 3RRT Oligonucleotide	12μL	24 μL	6μL	12μL
	2	●dNTP Mix (10 mM)	40 μL	80 μL	20 μL	40 μL
	3	●Deionized H₂O	100 μL	100 μL	100 μL	100 μL
	4	●5X First-Strand Buffer (RNase-Free)	60 μL	120 μL	30 μL	60 μL
	5	●SUPERSWITCH™ SolutionⅠ	10 μL	20 μL	5 μL	10 μL
	6	●SUPERSWITCH™ SolutionⅡ	10 μL	20 μL	5 μL	10 μL
	7	●RNase Inhibitor (40 U/μL)	12 μL	25 μL	6 μL	12 μL
	8	●SUPERSWITCH™ Reverse Transcriptase (200 U/μL)	12 μL	25 μL	6 μL	12 μL
	9	●SUPERSWITCH™ 5RRT Oligonucleotide	12 μL	24 μL	6 μL	12 μL
PCR	10	●5AP PCR Primer (12 μM)	100 μL	200 μL	100 μL	200 μL
	11	●3AP PCR Primer (12 μM)	100 μL	200 μL	100 μL	200 μL
	12	●Marathon DNA Polymerase（1U/μL）	24μL	48μL	24 μL	48 μL
	13	●2×PCR Buffer	765μL	1530 μL	765μL	1530 μL
	14	●2.5 mM dNTP	160μL	320 μL	200 μL	400 μL

1. 试剂盒2：Tiosbio™ 200bp Cleaner

目的	试剂		PacBio		Nanopore
目的	试剂		M/30次	L/60次	M/30次	L/60次
PCR 产物纯化	1	○Buffer P5	7.5 mL	15 mL	15 mL	30 mL
PCR 产物纯化	2	○Wash Buffer	3.25 mL	6.5 mL	6.5 mL	13 mL

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