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Blasticidin S (10 mg/ml) 杀稻瘟菌素S (灭瘟素)(10 mg/ml)

货号 ant-bl-1 售价 515
规格 10mg CAS号 3513-03-9
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产品信息

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品名

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Invivogen

ant-bl-1

Blasticidin(杀稻瘟菌素,灭瘟素)

10mg

515

Invivogen

ant-bl-1

Blasticidin(杀稻瘟菌素,灭瘟素)

5×10mg

2100

Invivogen

ant-bl-1

Blasticidin(杀稻瘟菌素,灭瘟素)

50×10mg

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产品简介
      Blasticidin S(杀稻瘟菌素),也称为稻瘟散,灭瘟素S盐酸盐,从灰色链霉菌Streptomyces griseochromogenes分离到的一种核苷肽类抗生素。通过干扰核糖体机制中的肽键形成来抑制蛋白质合成。

蜡样芽孢杆菌(bsr) 的杀稻瘟菌素抗性基因赋予了对杀稻瘟菌素的抗性,该基因编码杀稻瘟菌素-S脱氨酶[1]。
对Streptoverticillum sp [2] 的blastcidin S乙酰基转移酶基因(bls)和对曲霉菌 [3]的blasticidin S脱氨酶基因(BSD)也赋予了对杀稻瘟菌素的抗性。
通常,哺乳动物细胞对杀稻瘟素浓度为1-10 µg / ml敏感,对细菌为25-100 µg / ml敏感。
由杀稻瘟菌素诱导的细胞死亡迅速发生,从而允许在一周内选择带有杀稻瘟素抗性基因的转染细胞系。 

技术指标
产品浓度: 10 mg / ml
质量控制:每个批次都经过全面测试,以确保批次之间不存在差异。
纯度: ≥95%(HPLC)
内毒素水平: <1 EU / mg
物化特性: pH,外观
经过细胞培养测试:在对杀稻瘟菌素敏感和抗杀稻瘟素的哺乳动物细胞系中验证了效力
痕量污染物的非细胞毒性:对杀稻瘟菌素耐药的细胞没有长期作用


抗性基因:
三种杀稻瘟菌素抗性基因已被克隆且测序:一种是乙酰转移酶基因,来自杀稻瘟菌素产生菌的bls基因;另外两种是脱氨酶基因(deaminase genes),分别为来自bacillus cereus蜡样芽孢杆菌的bsr基因,和来自Aspergillus terreus土曲霉的BSD基因。bsr和 BSD 基因是最主要的选择性标记基因,用于哺乳动物和植物细胞的转基因实验。虽然bsr和 BSD 基因多用于哺乳动物细胞的筛选标记,但也可以用于E. Coli。

工作浓度
杀稻瘟菌素对哺乳动物细胞系的工作浓度从1到10μg/ ml不等,在某些情况下高达30μg/ ml。
在开始的实验中,我们建议确定杀死宿主细胞系所需的最佳抗生素浓度。
处理后,细胞死亡迅速发生,从而允许在转染后的7天之内用带有bsr或BSD基因的质粒选择转染的细胞。
下面列出了在哺乳动物细胞的一些实例中用于选择的杀稻瘟素的建议浓度。


细胞系

介质

浓度

参考文献

CHO(中国仓鼠卵巢细胞)

记忆体

5-10微克/毫升

1,2

HEK293(人类胚胎肾细胞)

记忆体

5-15微克/毫升

3 4

HeLa(人类子宫细胞)

记忆体

2.5-10微克/毫升

56

Neuro2a(小鼠成神经细胞)

记忆体

30微克/毫升

7

THP-1(人类单核细胞)

RPMI

10微克/毫升

8

参考文献:
1. Dorgham K.等,2009。一种具有抗炎活性的工程CX3CR1拮抗剂。J Leukoc生物学。86(4):903-11。
2. Le Bon L.等人,2014。边缘蛋白调节Notch-配体顺式和反式相互作用,以指定信号状态。eLife Sci,3:e02950。
3. Tomecki R.等人,2014。多发性骨髓瘤相关的hDIS3突变引起细胞RNA代谢紊乱,并暗示hDIS3 PIN结构域可能是潜在的药物靶标。核酸研究。42:1270-90。
4.Edbauer D.等人,2004。尼卡斯汀和早老素的共表达挽救了APH-1功能突变的丧失。279:37311-5。
5. Khandelia P.等人,2011。简化的平台,可在哺乳动物细胞中短发夹RNA干扰和转基因。PNAS 108:12799-804。
6. Lee HK.et al。,2007。β-内酰胺酶互补作用在高通量筛选toll样受体信号抑制剂中的应用。摩尔Pharmacol。72:868-75。
7. Matsumoto G.等人,2011年。p62 / SQSTM1的丝氨酸403磷酸化调节泛素化蛋白的选择性自噬清除。摩尔细胞。44:279-89。

8. Schepetkin IA。等人,2009。从桔梗上皮中分离出的卵泡蛋白B的免疫调节活性。J Immunol。183:6754-66。

https://www.invivogen.com/sites/default/files/invivogen/resources/documents/invivogen-infocus-cell-culture-contamination.pdf