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Zymo品牌酵母相关产品专栏

作为Zymo Research,我们的第一批产品旨在简化酵母研究,这就是我们现在商标上三个“萌芽酵母”的灵感来源。除了其他的酵母DNA和RNA纯化技术,我们还提供酵母生长和转化产品。对于酵母和真菌的转化,一种独特配方的YPD培养基(YPD Plus)将大多数酵母菌株的转化效率提高了≥ 50%。我们的Frozen-EZ Yeast Transformation II试剂盒旨在使酵母转化比传统方法更简单、更高效。除此之外,我们还为酵母研究人员提供了几种特殊产品,包括α因子/a因子交配信息素和5-氟乳清酸。酵母裂解酶和酵母蛋白试剂盒仍然分别是酵母裂解和蛋白纯化的重要试剂。

商品目录
酵母溶解酶
1——Zymolyase-酵母裂解酶。
酵母质粒和DNA纯化
2——Zymoprep™酵母质粒Miniprep I, II
3——YeaStar™基因组DNA
酵母转化
4——YPD Plus™
5——Frozen-EZ酵母转化II试剂盒
酵母交配信息素
6——α因子交配信息素
7——a因子交配信息素
特种化学品和其他
8——5-FOA
9——YeaStar™ RNA 试剂盒
10——酵母蛋白试剂盒

1.Zymolyase-酵母菌的水解酶

100T当量:从藤黄节杆菌中制备。基本的酶活性是β-1,3-葡聚糖酶和β-1,3-葡聚糖昆布淀粉酶。

 方便:提供冻干和存储缓冲液,用于重组。

 高效的细胞壁消化:提供的存储缓冲已经过优化,以赋予最大水平的酶活性

酵母和真菌细胞壁的消化是许多实验过程所必需的,包括染色体制片、免疫荧光、转化、蛋白质纯化等。裂解酶如酶解酶的使用通常用于消化。来自Zymo Research的酶解酶是从藤黄节杆菌中制备的,冻干,并与再悬浮缓冲液一起包装。

缓冲液已经过优化,以赋予最大水平的酶活性。

这种酶的主要活性是β-1,3葡聚糖酶和β-1,3葡聚糖昆布五糖水解酶,它们水解β-1,3葡聚糖键上的葡萄糖聚合物,释放昆布五糖作为主要产物。最佳酶活性为30°~ 37°C;裂解活性在较高的温度下停止。R-Zymolyase重组时含有0.5 U/μl RNase A。

敏感真菌属:阿氏囊霉属、假丝酵母属、德巴霉属、假囊霉属、内菌属、汉逊酵母属、汉逊酵母属、克勒克酵母属、克鲁维酵母属、斯达氏油脂酵母属、梅奇酵母属属、毕赤酵母属、普鲁兰属、酵母属、糖菌属、糖菌属、裂殖酵母属、球拟酵母属。

酶解酶可用于酵母菌聚糖外壳和球质体的酶解形成。箭头指示球质体的细胞核和细胞内成分通过部分消化的质膜

*资料来源:

通过扫描电子显微镜(SEM)分离和可视化酵母细胞核的方案

Elena Kiseleva, Terry D Allen, Sandra A Rutherford, Steve Murray, Ksenia Morozova, Fiona Gardiner, Martin W Goldberg & Sheona P Drummond.

Nature Protocols 2, 1943 - 1953 (2007) Published online: 9 August 2007 doi:10.1038/nprot.2007.251

 

 

产品

货号

规格说明

规格表

应用

Zymolayse -酵母水解酶

E1004

1000U

酶浓度5 U/µl总蛋白浓度:10 - 15mg /ml存储:-70°C
单位定义:一个分解单位(U)定义为10%在800nm处持续30min, od值下降

原生质球/原生质体形成;酵母细胞融合;酵母转化

E1005

2000U

R-Zymolayse(与核糖核酸酶)

E1006

1000U

 

 2.Zymoprep™酵母质粒小提取试剂盒I, II

简单:快速,容易地从酵母中拯救质粒。

高效分离:适用于低拷贝和难以分离的质粒

高质量:分离的质粒DNA是分子生物学技术的理想选择,如PCR,转化,杂交等。

Zymoprep™酵母质粒小提取试剂盒提供了从酿酒酵母、白色念珠菌和酵母中分离质粒所需的所有试剂和任何细胞壁对酵母菌裂解酶敏感的真菌。该程序简单高效,无需需要玻璃珠或苯酚。可靠地从酵母菌菌落、平板贴片或液体培养中恢复质粒DNA的。该系统是低拷贝数和难分离质粒的理想选择。洗脱后的质粒DNA可直接用于大肠杆菌转化,PCR和Southern blot分析。

 

 

产品

货号

规格

说明

应用

zymoprep™酵母质粒 I

D2001

100Preps

格式:异丙醇沉淀
洗脱量:≥35µl
处理时间:35 - 90分钟
DNA大小限制:≤23kb

从酵母中回收质粒

zymoprep™酵母质粒Miniprep II

D2004

50Preps

格式:Spin-Column
洗脱量:≥10µl
处理时间:35 - 90分钟
绑定容量:5µg
DNA大小限制:≤23kb

 3.YeaStar™基因组DNA试剂盒

简单:快速旋转柱程序产生纯酵母基因组DNA,不使用玻璃珠或苯酚。

多功能:有效的DNA分离从广泛的真菌物种易感的酶解酶。

高质量:分离的基因组DNA可用于Southern blotting, PCR,限制性内切酶切等。

      YeaStar™基因组DNA试剂盒设计用于可靠和高效地从广泛的真菌基因组DNA分离包括烟曲霉、尼度曲霉、金黄色尼氏曲霉、白色念珠菌、毕赤酵母、酿酒酵母菌,裂聚糖酵母菌,以及任何细胞壁对酵母菌裂解酶敏感的真菌的该试剂盒基于高效酶解和Zymo-Spin™柱技术。每个标准液可产约7 - 20µg的DNA大小分布在35 - 60kb之间。得到的基因组DNA可以用于直接分析,包括Southern blotting, PCR,限制性内切酶消化等。

  

DNA的琼脂糖凝胶电泳

YeaStar™基因组DNA试剂盒线:M: λ-DNA Hind III标记;

1:美国酵母;2: p . pastoris;3:白念珠菌;4:美国非洲酒。

 

产品

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规格

说明

应用

YeaStar™基因组DNA试剂盒

D2002

40preps

格式:Spin-Column
绑定容量:25µg
洗脱量:≥60µl
处理时间:1.5小时

酵母;Zymolayse-sensitive真菌;gDNA隔离

4.YPD Plus

最大化转化效率:特殊配方的酵母生长培养基增加酵母转化效率提高50%。

更好的结果:推荐用于突变酵母菌株,表现出不适合的生长特性转换。

简单:只需补充酵母转化反应混合物与YPD Plus™,以实现酵母的持续增加转换效率。

      在酵母转化协议的outgrowth步骤通常是提高整体酵母转化效率的关键。这是有用的,当试图最大化转化效率的文库筛选或转化酵母与多重质粒。YPD Plus™是一种特殊配方的酵母转化效率提高> 50%。推荐使用YPD Plus™对于突变的酵母菌株,表现出不好的生长特性,不易于转化。只需补充酵母与YPD Plus™的转化反应混合物,以实现酵母转化效率的持续提高。

 

YPD与Zymo Research的YPD Plus™培养基的比较。酵母在这两

种标准中都执行了转换和生长YPD或YPD Plus™介质。转化体的

相对百分比如左边的图形。每个图代表相对转换效率从六个单独

的转换取平均值。

产品

货号

规格

应用

酵母puls

Y1003-50

50ml

酵母转化和生长

Y1003-100

100ml

5.Frozen-EZ酵母转化II™试剂盒

快速:具有高转化效率的酵母细胞可以在10分钟内制备。

简单:在不携带DNA的情况下,可以在≤1小时内转化单个或多个质粒的酵母。

多功能:可用于酿酒酵母,以及其他真菌,包括白色念珠菌,绒球酵母和巴斯托拉斯酵母。兼容的有圆形和线性DNA。

       Frozen-EZ酵母转化II™试剂盒旨在使酵母转化和库筛选更容易和更多比目前可用的方法有效。酵母细胞可立即转化或存储(即≤-70℃)稍后使用。用该试剂盒制备的酵母可以转化环状和线性dna。还有冰冻ez酵母Transformation II™试剂盒可用于其他真菌,包括白色念珠菌、绒球酵母和巴斯德氏酵母。

 

 

产品

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规格

说明

应用

Frozen-EZ酵母转化II™试剂盒

T2001

120rxns

转换效率:105-106cfu /µg
转化DNA输入:0.2 - 1.0µg
活性细胞稳定性:-70°C条件下≥1年

活性酵母细胞制备;

相容性:S. cerevisiae, S。

6.酵母α-因子(α-因子)交配信息素水溶液。

       当酵母“a”和“α”细胞遇到相反细胞类型的交配信息素时,它们会诱导交配所需的基因,G1的细胞周期受到抑制,细胞表面和核决定因子发生改变,并在梨中发生显著的形态伸长形状,亲切地称为“闲谈”。这些改变使酵母细胞为交配和融合形成稳定的二倍体做好准备。a/α二倍体对两种类型的交配信息素都不敏感,但可以通过营养诱导进行减数分裂剥夺。利用酵母交配信息素对细胞周期、细胞形态、转录等方面的研究具有开创性意义诱导,以及信号转导途径。酶研究提供了α-因子肽交配信息素作为一种随时可用的液体,已被优化的两种活性稳定性,并保证通过多次冻融循环保持生物功能。

 

α-因子活性测定。α因子肽信息素(10 μl)作用于MATa细胞草坪上的无菌过滤器,分别为野生型BAR1 (200 μM,右)pro挑逗或BAR1 Δ (50 μM,左;5μM,中心)。敏感的α-因子明显表现为清理区(G1逮捕了细胞)。BAR1蛋白酶缺失的细胞对α-因子的活性比bar -1蛋白酶阳性的野生株高需要多20 - 50倍的信息素来阻止细胞。

7.a-Factor Mating Pheromone

酵母a因子(a因子)交配信息素水溶液

      a-因子是酵母中两种交配信息素之一。它是交配信息素α-因子(alpha-factor)的“异性”。当酵母a和α细胞遇到相反的交配信息素时,它们会诱导交配所需的基因,阻止细胞周期G1,改变细胞表面和核决定因子,并引起形态改变。

产品

货号

规格

说明

应用

α-Factor Mating Pheromone

Y1001

240ul

分子量:1684.0

活性试验:G1阻滞

纯度:> 98%,HPLC

储存:-20°C

酵母交配感应;G1期抑制

a-Factor Mating Pheromone

Y1004-500

500ul

分子量:1630

活性试验:G1阻滞

纯度:> - 80%,HPLC法测定

存储:-20°C

8.5-Fluoroorotic酸(5-FOA)

酵母菌遗传反选择剂:常用来固化酵母菌菌株的质粒、质粒改组、等位基因更换,双混合屏幕。

方便:可作为纯粉末或现成的DMSO溶液。

超纯:通过薄层色谱(TLC)、熔点和批比测定> 98%。

       利用5-氟乳酸菌(5-FOA)进行酵母反选择是一种常用的遗传筛选方法。固化酵母株质粒、质粒洗牌、等位基因置换和双杂交筛选等方法都可以利用5-FOA。否则5-FOA对酵母无毒,在表达功能性URA3基因编码的菌株中,5-FOA被转化为毒性形式(即5-氟尿嘧啶)对于参与尿嘧啶合成的渥洛汀-5 ' -单磷酸脱羧酶。表型为Ura+的酵母菌株选择后成为Ura-和5-FOAR。使用超纯(> 98%)5-FOA粉末时,由于其不溶性,研究者经常提出5-FOA的溶解度问题水。因此,我们在DMSO中提供了100倍浓度(100 mg/ml)的5-FOA溶液。这是经过测试和验证的基础上计数器选择活动。

       使用5-FOA计数器选择酵母。对尿嘧啶营养不良的酵母菌(ura3-1)进行了检测在含有5-FOA的培养基上生长的能力。检测了三种菌株:单独的wt (YZ1),带有低拷贝率URA3的wt质粒(YZ2),以及缺失一个不能失去补体的基本基因的突变株(ΔEG)URA3质粒(YZ3)。从左到右,从上到下为合成完全葡萄糖培养基(SC): 1。SC,合成完全无5FOA;2.标准- SC-5-FOA (SC-5-FOA由超纯5-FOA粉末制成,1克/升)SC-5-FOA由100X 5-FOA制成。 

解决方案:

       对于每个平板,上面:酵母菌株:YZ1野生型,Ura- (wt, Ura- 3-52),右边:酵母菌株:YZ2, wt携带低拷贝,URA3左图:酵母株:YZ3: ΔEG,含互补质粒(pRS316: EG, URA3, CEN)。的在所有含有5-FOA的培养基中,对菌株YZ3的反选择都是明显的,没有明显的5-FOAR菌落对照菌株YZ1和YZ2的细胞可以在5-FOA培养基上生长。

产品

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规格

说明

应用

5-FOA(粉剂)

F9001-1

1g

分子量:174.0;
鉴别方法:薄层色谱法、熔点法和很多比较;
纯度:TLC估计98%,熔点;

批次比较溶解度:50mg/1ml(1:1 NH4OH:H2O)缓慢加热,   > 100mg/ml DMSO
储存方式:冷冻保存

酵母计数器选择;酵母二者混合屏幕;质粒固化;质粒转移;等位基因替换

F9001-5

5g

100X 5-FOA(液体)

F9003

10ml

 

9.YeaStar™RNA试剂盒

简单:快速旋转柱程序产生纯酵母RNA,不使用玻璃珠或苯酚。

多功能:有效的RNA分离从广泛的真菌物种易感的酶裂解酶。

高质量:分离出的RNA适用于RT-PCR, northern blotting等

       YeaStar™RNA试剂盒能够从广泛的真菌中提取RNA,包括:烟曲霉,尼度曲霉,金黄色念珠菌,白色念珠菌,毕赤酵母,酿酒酵母菌,酵母。这个工具包非常适合从任何可以被酵母菌裂解酶分解的真菌中提纯高质量的总RNA。该试剂盒有助于使用创新的Zymo-Spin™柱技术从1-1.5 ml培养细胞中提纯10-25份总RNA。

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规格

说明

应用

YeaStar™RNA试剂盒

R1002

40Preps

格式:旋转列洗脱量:≥60µl

绑定容量:25µg/prep

大小限制:≥200 nt

处理时间:30分钟

酵母;对酵母菌裂解敏感的真菌裂解酶(即发酵酶);核糖核酸隔离

 10.酵母蛋白试剂盒

方便:快速有效的酵母菌裂解下游蛋白和DNA分析方法。

多功能:程序适用于任何对酶解酶敏感的真菌物种。

有效的球化:western blotting和PCR的理想方案。

       酵母蛋白试剂盒是一种简单、方便的方法。酵母菌细胞快速而彻底的裂解该试剂盒已经过优化,用于酿酒酵母和白色念珠菌,但可以用于任何对酵母菌裂解酶(zymolyase)敏感的真菌种类消化。消化过程可以有效地生成球质体,这使得它们成为蛋白质和DNA分析的理想选择,分别包括Western blotting和PCR。

产品

货号

规格

应用

酵母蛋白试剂盒

Y1002

200preps

酵母细胞溶菌作用;蛋白质分析;DNA分析