REVIEW

近年来，SARS-CoV-2病毒全球大流行，给病毒诊断带来了巨大的挑战。以往的核酸检测方法因复杂的样品处理和昂贵的仪器设备，且检测时间过长（约2小时），降低病毒检测的速度。因此，市场迫切需要核酸分子检测从标准的核酸检测实验室向快速POCT转移。安普未来的MIRA技术凭借着快速、简便、灵敏、便携的优势，为推动该项需求的实现做出显著贡献。

将核酸扩增与CRISPR结合，是当下一种新型核酸检测方法。已有多位科研老师将MIRA技术与CRISPR技术做结合，在检测SARS-CoV-2病毒时，显示出优异的灵敏度、特异性，尤其在检测的高效和便捷方面，显著优于其他技术，为实现快速POCT提供了解决方案！

MIRA技术结合

CRISPR Cas12、Cas13a蛋白

武汉大学医学研究院/教育部免疫与代谢前沿科学中心的殷昊教授和张楹教授课题组，在《Nature Biomedical Engineering》期刊上发表题为“Fast and sensitive detection of SARS-CoV-2 RNA using suboptimal protospacer adjacent motifs for Cas12a”的文章，影响因子29.234。

实验成功开发了一种基于恒温扩增（安普未来恒温扩增试剂）和CRISPR相结合一步法荧光检测（SARS-CoV-2）的方法，检测时间小于20 分钟，灵敏度与RT-qPCR一致且特异性强。该方法快速、灵敏和便于操作。

（使用安普未来试剂来检测SARS-CoV-2的方法流程图）

（荧光信号在6-10 min时开始出现，在9-15min时逐渐达到平台期）

实验同步还使用了美国雅培的TwistDx恒温扩增试剂做对比。结果显示，安普未来的MIRA试剂和雅培的灵敏度一致，检测限为24拷贝/反应。但雅培与Cas12a、Cas13a的缓冲环境并不完全兼容。安普未来的MIRA试剂在保证准确性、灵敏度的同时，稳定性和兼容性更胜一筹！

（文章引用：https://www.nature.com/articles/s41551-022-00861-x）

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MIRA技术结合

CRISPR Cas13蛋白

中国人民解放军疾病预防控制中心宋宏彬主任的课题组在《JOURNAL OF MEDICAL VIROLOGY》发表了题为“Highly sensitive and rapid detection of SARS-CoV-2 via a portable CRISPR-Cas13a-based lateral flow assay”的文章，影响因子20.693。

实验采用两步法的操作方法，研究人员针对SARS-CoV-2 N基因序列设计筛选了MIRA扩增的引物，使用安普未来试剂，参考说明书进行体系配制，在42°C条件下扩增30 min。MIRA完成扩增后结合CRISPR技术分别进行了荧光法的检测和试纸条的检测。

（使用安普未来试剂来检测SARS-CoV-2的荧光或免疫层析法流程图）

（结果显示检测限为0.25拷贝/μl）

实验中，荧光和免疫层析检测SARS-CoV-2的检测限均为0.25拷贝/μl，即2.5拷贝/反应，MIRA技术的灵敏度优于市场上常规扩增试剂，得到了刘洪波老师等的高度认可。

该实验将MIRA与CRISPR结合，提供了一个可视化检测方法，且反应温度为37-42°C，控温要求低，节省了昂贵仪器的成本，大大提高现场检测的可能性。

（文章引用：https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1002/jmv.28096）

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MIRA技术结合

CRISPR Cas12a蛋白

亚能生物汤光辉博士的课题组在《PLOS Biology》期刊上发表了题为“Rapid detection of SARS-CoV-2 with CRISPR-Cas12a.”的文章，影响因子9.593。文中介绍了一种基于CRISPR Cas12a的检测SARS-CoV-2的方法。