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Alexa Fluor 488 -WGA Alexa Fluor 488标记麦胚凝集素
货号 | DU-035 | 售价(元) | 1680 |
规格 | 1mg | CAS号 |
- 产品简介
- 相关产品
货号 |
名称 |
规格 |
存储 |
DU-035 |
Alexa Fluor 488-WGA (Alexa Fluor 488 labeled Wheat Germ Agglutinin) Alexa Fluor 488 标记麦胚凝集素 |
1mg |
-20℃避光干燥保存 |
麦胚凝集素(Wheat Germ Agglutinin,WGA)是广泛应用于细胞生物学的凝集素之一。WGA识别的糖类受体是 N-乙酰葡糖胺(GlcNAc),倾向与 N-乙酰葡糖胺的二聚体和三聚体结合。WGA 能结合含 N-乙酰葡 糖胺末端或壳二糖的寡糖,这类结构在许多血清和膜来源糖蛋白中普遍存在。细菌细胞壁肽聚糖、甲壳素(几丁质)、软骨糖胺聚糖和糖脂也能结合 WGA。天然 WGA 还能通过 N-乙酰神经氨酸(唾液酸)残基与 一些糖蛋白相互作用。WGA 适用于胰岛素受体的纯化、血清蛋白和神经示踪。
麦胚凝集素(Wheat Germ Agglutinin,WGA)通常用来标记糖蛋白,用于活细胞或固定细胞的质膜成像, 用于组织切片染色或其它标准的免疫分析实验。WGA 能用作一种革兰氏染色剂,荧光标记革兰氏阳性菌(非革兰氏阴性菌)。还能用于结合出芽酵母(比如酿酒酵母)的出芽痕。
本品是 Alexa Fluor 488 标记的麦胚凝集素(Alexa Fluor 488 labeled Wheat Germ Agglutinin, Alexa Fluor 488- WGA),Ex/Em=495/519nm,亲和纯化所得,基本不含未标记的荧光素。建议工作浓度范围是 5-20μg/ml。
产品性质
1) 英文同义名:Wheat Germ Agglutinin, Alexa Fluor 488 Conjugate; Alexa Fluor 488 labeled Wheat Germ Agglutinin; Wheat germ agglutinin lectin, Alexa Fluor 488 Conjugate; Alexa Fluor 488labeled WGA Lectin;
2) 中文同义名:麦胚凝集素,Alexa Fluor 488 标记;Alexa Fluor 488 标记的麦胚凝集素;Alexa Fluor 488
标记的小麦胚芽凝集素;
3) 糖类特异性:N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)
4) 外观:固体
5) Ex/Em:495/519nm
6) 荧光颜色:绿色
7) 应用:IF、糖生物学
质膜标记操作流程
一、储存液准备
于使用前,将低温保存的 Alexa Fluor 488-WGA(1mg)置于室温回温至少 30min,低速离心 2-3min,往管 内加入 500µl ddH2O(无菌)制备 2mg/ml 储存液。短时间使用可保存在 2-8℃,长时间使用请根据单次用量分装保存后置于-20℃保存,避免反复冻融,至少一个月稳定。
二、标记活的真核细胞 以下是对贴壁培养在盖玻片上的活细胞的通用染色步骤。用户需根据不同的模型系统和预期效果来优化染 色时间和浓度。
2.1 制备染色工作液:用合适的生理缓冲液,比如:HBSS(无酚红)或 HHBS,稀释 Alexa Fluor 488-WGA(2mg/ml)储存液到工作浓度,常用工作浓度范围为 5-20μg/ml。 使用细胞培养基稀释 WGA 偶联物用于标记可能导致增高的非细胞染色背景。
2.2 细胞标记:加入足量的染色工作液完全覆盖盖玻片上的细胞。37℃孵育 10-30min。
2.3 细胞清洗:标记结束后,吸走染色工作液,用合适的缓冲液清洗细胞 2 次。除非细胞要做固定,此时即可在预热的 HBSS 或其它适合于成像的缓冲液中封片。
2.4 【可选】细胞固定:可能用 4%多聚甲醛固定染色好的细胞,37℃ 15min,之后用缓冲液清洗,以及做 另一种复染。如有必要用 0.2% Triton X-100 透化细胞。
三、标记固定的真核细胞 以下是对贴壁培养、甲醛固定且未做透化处理细胞的通用染色步骤。用户需根据不同的模型系统和预期效 果来优化染色时间和浓度。
3.1 细胞固定:4%多聚甲醛固定细胞,37℃处理 15min。
3.2 细胞清洗:用 HBSS(不含酚红)清洗细胞三次。不要透化细胞!!!
3.3 准备染色工作液:用合适的生理缓冲液,比如:HBSS(无酚红)或 HHBS,稀释 Alexa Fluor 488-WGA(2mg/ml)储存液到工作浓度,常用工作浓度范围为 5-20μg/ml。 使用细胞培养基稀释 WGA 偶联物用于标记可能导致增高的非细胞染色背景。
3.4 细胞标记:加入足量的染色工作液完全覆盖盖玻片上的细胞。室温孵育 10-30min。
3.5 细胞清洗:标记结束后,吸走染色工作液,用合适的缓冲液清洗细胞 2次。此时可能用 0.2% Triton X-100
或其它表面活性剂透化细胞,进行接下来的复染或抗体标记。
3.6 细胞成像:按照实验需求用另一复染剂染色,之后在缓冲液内封片或抗荧光淬灭剂来封片。
保存与运输方法
保存:-20℃避光干燥保存,至少 1 年有效。 运输:冰袋运输。
注意事项
1) 本品储存液长期保存可能会产生沉淀,使用前请37℃温育数分钟,之后离心吸取上清使用。此操作基本不会对产生性能造成负影响。
2) 荧光染料都存在淬灭的问题,保存和操作过程中注意避光。
3) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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