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Phalloidin-AMCA Conjugate 鬼笔环肽-AMCA

货号 LX4510 售价(元) 1857
规格 300T CAS号
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产品信息

货号

名称

规格

价格/

LX4510

Phalloidin-AMCA Conjugate 鬼笔环肽-AMCA

300T

1857




产品简介

鬼笔环肽是一种从鬼笔鹅膏中得到的有毒的环状七肽,可以与纤维肌动蛋白丝非常特异的结合,并且具有很高的亲和力。它能使肌动蛋白聚合物的临界浓度降低到小于1µg/mL,因此,常作为一种聚合促进剂使用。该物质可以被绿色荧光染料标记,从而作为标记物用于组织细胞培养、组织切片或无细胞系中的肌动蛋白标记。

注意事项:             

鬼笔环肽的分子量小,很容易通过细胞,不需要对细胞进行冷丙酮和TRITON X-100处理。毒性较大,戴上手套操作。

鬼笔环肽(Phalloidin)的结合阻止丝状肌动蛋白(微丝)的解离,稳定微丝结构,从而破坏微丝的聚合-去聚合的动态平衡。此特性使得肌动蛋白聚合发生的临界浓度(CC)降至<1µg/mL,因此,可用作一种聚合促进剂。此外,鬼笔环肽还可抑制F-actinATP水解活性。

本品为鬼笔环肽-AMCA偶联物产品的光谱学相关参数为Ex=353/ Em=442;其对应分子量大小为1003.88。选择性地结合F-肌动蛋白。以纳摩尔浓度使用,鬼笔环肽衍生物是方便的探针,用于标记,鉴定和定量甲醛固定和透化组织切片中的F-肌动蛋白,细胞培养物或无细胞实验。肌动蛋白是一种球状的,大约42kDa的蛋白质,几乎存在于所有真核细胞中。 它也是最高度保守的蛋白质之一,与藻类和人类不同的物种相差不超过20%。 肌动蛋白是细胞中两种细丝的单体亚基:微丝,细胞骨架的三个主要组分之一,以及微丝,是肌细胞中收缩装置的一部分。 因此,肌动蛋白参与许多重要的细胞过程,包括肌肉收缩,细胞运动,细胞分裂和胞质分裂,囊泡和细胞器运动,细胞信号传导,以及细胞连接和细胞形状的建立和维持。

本品以1000×储存液形式(溶于DMSO)提供。按照100µl/孔(96孔板),总共可做300T

操作步骤

1. 制备 1× AMCA 鬼笔环肽工作液:

在含有 1% BSA 1 mL PBS 中加入 1 μL 1000×AMCA Phalloidin DMSO 溶液。

注意:1. 不同的细胞类型可能染色不同。AMCA鬼笔环肽工作溶液的浓度应相应地制备。

2. 1% 牛血清白蛋白 (BSA) 用于减少非特异性背景染色。

2. 染色细胞:

2.1 用 PBS 清洗细胞 2-3 次。在室温下将细胞固定在 3.7% 不含甲醇的 PBS 甲醛溶液中 10-30 分钟。

注意:避免使用任何含有甲醇的固定剂,因为甲醇会在固定过程中破坏肌动蛋白。优选的固定剂是不含甲醇的甲醛。

2.2 固定细胞用 PBS 清洗 2-3 次。

2.3 可选:将 PBS 中的 0.1% Triton X-100 添加到固定细胞中 3-5 分钟以增加渗透性。用 PBS 清洗细胞 2-3 次。

2.4 固定好的细胞中加入100 μL/孔(96孔板)AMCA鬼笔环肽工作液,室温染色20-90分钟。

2.5 用 PBS 轻轻冲洗细胞 2-3 次以去除多余的 AMCA 鬼笔环肽。

注意事项

1)DMSO有毒,使用时请小心操作。

2)了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

Note:   鬼笔环肽具有毒性,需小心操作(对人,其半数致死剂量为2mg/Kg)。 

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