产品简介：

Cell Tracker TM  CM-DiI荧光染料可以自由穿过细胞膜进入细胞，转化为细胞膜不可渗透的反应产物。Cell Tracker TMCM-DiI 染料通过几代保留在活细胞中。Cell Tracker TMCM-DiI 染料至少能稳定发出 72 h 的荧光，具有理想的跟踪性能，且拥有性质稳定，工作浓度无毒性，良好的细胞保留性等优点，在生理 pH 条件下可具有明亮的荧光。CM-DiI 在细胞固定、破膜及石蜡包埋的整个过程中均能很好的保留在细胞内，因此，与传统细胞膜探针DiI 相比较，更适于固定后标本的长期示踪。此外，CellTracker TM  CM-DiI 染料的激发和发射光谱与 GFP（绿色荧光蛋白）光谱充分分离，可以多种颜色复用，其红色/绿色的光谱特征，使其可与绿色探针或者绿色荧光蛋白如GFP一起用于双标实验。

产品特性:

分子式：C68H105Cl2N3O

分子量：1051.5

CAS 号：180854-97-1

Ex/Em: 553/570 nm

溶解性：溶于DMSO，乙醇，DMF

保存条件：-20℃避光保存。

实验步骤：

1.  染色液制备

a.配置 DMF,DMSO 或 EtOH 储存液：储存液用 DMF ,DMSO 或 EtOH 配制浓度 1-2mg/ml 。

注： 未使用的储存液保存在 -20 ℃，分装保存，避免反复冻融。

b.工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基， HBSS 或 D-PBS ）稀释储存液，配制浓度为 1 ～ 2 μM 的工作液。

注： 最佳的工作液浓度请根据不同细胞和自身的实验体系来调整。

2.  细胞标记 （悬浮细胞）

a.在标记前根据实验要求按照上述方法配制好工作液；

b.建议待标记细胞在染色工作液中于 37 ℃孵育≤ 5min ，再于 4 ℃孵育 15min （低温孵育可降低细胞对染料的内吞作用，有助于染料对质膜的标记，并且降低染料定位细胞质囊泡的可能性）。

c. 标记完成后，用 PBS 清洗细胞，并用新鲜培养基重悬细胞。

注： 对于贴壁细胞，可直接就贴壁状态的细胞进行荧光标记，相较于消化处理后的细胞具有更高的活力。

3.  染色后处理

a. CM-DiI 染色后的细胞直接用 3.7%  甲醛（溶于 PBS ），于 37 ℃固定 10min ；

b.室温条件 PBS 清洗 2 次，每次 5min ；

c.于 -20 ℃中，用丙酮透化处理 10min ；

d.室温条件 PBS 清洗 2 次，每次 5min ；并根据自身的实验要求以及细胞类型，进行后续的实验如石蜡包埋 - 免疫组化分析，电镜分析等。有报道提到，经 CM-DiI 染色后的大鼠嗜铬细胞瘤细胞可兼容 2%(w/v) 多聚甲醛和 0.2%(w/v) Triton X-100 的透化作用；从绵阳淋巴细胞内再次纯化的 CM-DiI 标记细胞，经甲醛固定，石蜡包埋，切片，二甲苯脱蜡，梯度乙醇，以及脱水后仍能维持荧光.

注意事项：

      荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

      本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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